• Функционални диагностични методи за изследване на заболявания на ендокринната система. Методи за изследване на заболяванията на ендокринната система

    Методи за изследване на ендокринните жлези

    За изследване на ендокринната функция на органите, включително ендокринните жлези, се използват следните методи:

      Екстирпация на ендокринни жлези.

      Селективно унищожаване или потискане на ендокринните клетки в тялото.

      Трансплантация на ендокринни жлези.

      Приложение на екстракти от ендокринни жлези на непокътнати животни или след отстраняване на съответната жлеза.

      Прилагане на химически чисти хормони на непокътнати животни или след отстраняване на съответната жлеза (заместваща „терапия”).

      Химичен анализ на екстракти и синтез на хормонални лекарства.

      Методи за хистологично и хистохимично изследване на ендокринни тъкани

      Метод на парабиоза или създаване на общо кръвообращение.

      Метод за въвеждане на "белязани съединения" в тялото (например радиоактивни нуклиди, флуоресцентни лампи).

      Сравнение на физиологичната активност на кръвта, която тече в и от даден орган. Позволява ви да откриете секрецията на биологично активни метаболити и хормони в кръвта.

      Изследване на нивото на хормоните в кръвта и урината.

      Изследване на съдържанието на прекурсори и метаболити на хормоналния синтез в кръвта и урината.

      Изследване на пациенти с недостатъчна или прекомерна функция на жлезата.

      Методи на генното инженерство.

    Метод на екстирпация

    Екстирпацията е хирургична процедура, която включва отстраняване на структурна формация, като жлеза.

    Екстирпация (extirpatio) от латински extirpo, extirpare - изкоренявам.

    Прави се разлика между частична и пълна екстирпация.

    След екстирпацията останалите функции на тялото се изследват с различни методи.

    С помощта на този метод са открити ендокринната функция на панкреаса и ролята му в развитието на захарен диабет, ролята на хипофизната жлеза в регулирането на растежа на тялото, значението на надбъбречната кора и др.

    Предположението, че панкреасът има ендокринни функции, се потвърждава от експериментите на И. Меринг и О. Минковски (1889), които показват, че отстраняването му при кучета води до тежка хипергликемия и глюкозурия. Животните умират в рамките на 2-3 седмици след операцията поради тежък захарен диабет. Впоследствие беше установено, че тези промени възникват поради липса на инсулин, хормон, произвеждан в островния апарат на панкреаса.

    В клиниката се среща екстирпация на ендокринни жлези при хора. Екстирпация на жлезата може да бъде умишлено(например при рак на щитовидната жлеза органът се отстранява напълно) или случаен(например при отстраняване на щитовидната жлеза се отстраняват паращитовидните жлези).

    Метод за селективно унищожаване или потискане на ендокринните клетки в тялото

    Ако се отстрани орган, който съдържа клетки (тъкани), изпълняващи различни функции, е трудно, а понякога и изобщо невъзможно, да се разграничат физиологичните процеси, извършвани от тези структури.

    Например, когато панкреасът бъде отстранен, тялото губи не само клетките, които произвеждат инсулин ( клетки), но също и клетки, които произвеждат глюкагон ( клетки), соматостатин ( клетки), гастрин (G клетки), панкреатичен полипептид (PP клетки). Освен това тялото е лишено от важен екзокринен орган, който осигурява храносмилателните процеси.

    Как да разберем кои клетки са отговорни за определена функция? В този случай можете да опитате да повредите селективно някои клетки и да определите липсващата функция.

    По този начин, когато се прилага алоксан (уреид на мезоксалова киселина), възниква селективна некроза клетки на островите на Лангерханс, което дава възможност да се изследват последствията от нарушеното производство на инсулин, без да се променят други функции на панкреаса. Хидроксихинолиново производно - дитизон пречи на метаболизма клетки образува комплекс с цинка, което също нарушава ендокринната им функция.

    Вторият пример е селективно увреждане на тироидните фоликулни клетки йонизиращо лъчениерадиоактивен йод (131I, 132I). Когато се използва този принцип за терапевтични цели, те говорят за селективна струмектомия, докато хирургичната екстирпация за същите цели се нарича тотална, субтотална.

    Този тип методи включват също проследяване на пациенти с клетъчни увреждания в резултат на имунна агресия или автоагресия и използване на химически (лекарствени) средства, които инхибират синтеза на хормони. Например: антитиреоидни лекарства - Mercazolil, popilthiouracil.

    Метод за трансплантация на ендокринни жлези

    Жлезата може да бъде трансплантирана в същото животно след предварителното й отстраняване (автотрансплантация) или в непокътнати животни. В последния случай се прилага хомо-И хетеротрансплантация.

    През 1849 г. немският физиолог Адолф Бертолд установява, че трансплантирането на тестисите на друг петел в коремната кухина на кастриран петел води до възстановяване на първоначалните свойства на кастрата. Тази дата се счита за рождена дата на ендокринологията.

    В края на 19-ти век Щайнах показа, че трансплантирането на гонади в морски свинчета и плъхове променя тяхното поведение и продължителност на живота.

    През 20-те години на нашия век трансплантацията на половите жлези с цел „подмладяване“ е използвана от Brown-Séquard и е широко използвана от руския учен С. Воронцов в Париж. Тези трансплантационни експерименти предоставиха богат фактически материал за биологичните ефекти на гонадалните хормони.

    При животно с отстранена ендокринна жлеза, тя може да бъде реимплантирана в добре васкуларизирана област на тялото, като например под капсулата на бъбрека или в предната камера на окото. Тази операция се нарича реимплантация.

    Метод на приложение на хормони

    Може да се прилага екстракт от ендокринни жлези или химически чисти хормони. Хормоните се прилагат на интактни животни или след отстраняване на съответната жлеза (заместителна „терапия”).

    През 1889 г. 72-годишният Браун Секуард съобщава за експерименти, проведени върху самия него. Екстракти от животински тестиси имаха подмладяващ ефект върху тялото на учения.

    Благодарение на използването на метода за въвеждане на екстракти от ендокринни жлези е установено наличието на инсулин и соматотропин, хормони на щитовидната жлеза и паратиреоиден хормон, кортикостероиди и др.

    Разновидност на метода е храненето на животни със суха жлеза или препарати, приготвени от тъкани.

    Използването на чисти хормонални лекарства позволи да се установят техните биологични ефекти. Нарушенията, възникнали след хирургично отстраняване на ендокринна жлеза, могат да бъдат коригирани чрез въвеждане в тялото на достатъчно количество екстракт от тази жлеза или отделен хормон.

    Използването на тези методи при непокътнати животни доведе до проява на обратна връзка в регулацията на ендокринните органи, т.к. изкуственият излишък на създадения хормон причинил потискане на секрецията на ендокринния орган и дори атрофия на жлезата.

    Химичен анализ на екстракти и синтез на хормонални лекарства

    Чрез извършване на химично-структурен анализ на екстракти от ендокринни тъкани беше възможно да се установи химическата природа и да се идентифицират хормоните на ендокринните органи, което впоследствие доведе до изкуственото производство на ефективни хормонални препарати за изследователски и терапевтични цели.

    Метод на парабиоза

    Не бъркайте с парабиозата на N.E. Vvedensky. В случая говорим за феномен. Ще говорим за метод, който използва кръстосана циркулация в два организма. Парабионтите са организми (два или повече), които са свързани помежду си чрез кръвоносната и лимфната система. Такава връзка може да се появи в природата, например при сиамски близнаци, или да бъде създадена изкуствено (в експеримент).

    Методът ни позволява да оценим ролята на хуморалните фактори в промяната на функциите на непокътнатия организъм на един индивид при намеса в ендокринната система на друг индивид.

    Особено важни са изследванията на сиамски близнаци, които споделят общо кръвообращение, но отделни нервни системи. При една от двете сиамски сестри е описан случай на бременност и раждане, след което е настъпила лактация и при двете сестри и е възможно хранене от четири млечни жлези.

    Радионуклидни методи

    (метод на белязани вещества и съединения)

    Обърнете внимание не на радиоактивните изотопи, а на веществата или съединенията, белязани с радионуклиди. Строго погледнато въвеждат се радиофармацевтици (РП) = носител + етикет (радионуклид).

    Този метод позволява да се изследват процесите на синтез на хормони в ендокринната тъкан, отлагането и разпределението на хормоните в тялото и пътищата на тяхното елиминиране.

    Радионуклидните методи обикновено се разделят на in vivo и in vitro изследвания. При in vivo изследванията се прави разлика между in vivo и in vitro измервания.

    На първо място, всички методи могат да бъдат разделени на в витро - И в vivo -изследвания (методи, диагностика)

    Ин витро изследвания

    Да не се бърка в витро - И в vivo -изследователски методи) с концепцията в витро - И в vivo -измервания .

      С in vivo измерванията винаги ще има in vivo изследвания. Тези. Невъзможно е да се измери в тялото нещо, което не присъства (субстанция, параметър) или не е въведено като тестващ агент по време на изследването.

      Ако изпитвано вещество е въведено в тялото, след това е взета биопроба и са извършени in vitro измервания, изследването все още трябва да бъде определено като in vivo изследване.

      Ако тестваното вещество не е въведено в тялото, но е взета биологична проба и е извършена in vitro - измервания, със или без въвеждане на тествано вещество (например реагент), изследването трябва да бъде обозначено като in vitro витро изследване.

    В радионуклидната in vivo диагностика по-често се използва улавянето на радиофармацевтици от кръвта от ендокринните клетки и се включва в получените хормони пропорционално на интензивността на техния синтез.

    Пример за използването на този метод е изследването на щитовидната жлеза с радиоактивен йод (131I) или натриев пертехнетат (Na99mTcO4), надбъбречната кора с помощта на белязан прекурсор на стероидни хормони, най-често холестерол (131I холестерол).

    За in vivo радионуклидни изследвания се извършва радиометрия или гама топография (сцинтиграфия). Радионуклидното сканиране като метод е остаряло.

    Отделна оценка на неорганичните и органичните фази на интратироидния стадий на йодния метаболизъм.

    При изследване на веригите на самоконтрол на хормоналната регулация в in vivo проучвания се използват тестове за стимулиране и потискане.

    Нека решим два проблема.

    За установяване характера на палпиращата се формация в десния лоб на щитовидната жлеза (фиг. 1) е направена 131I сцинтиграфия (фиг. 2).

    Фиг. 1

    Фиг.2

    Фиг.3

    Известно време след прилагането на хормона се повтаря сцинтиграфия (фиг. 3). Натрупването на 131I в десния лоб не се промени, но в левия се появи. Какво изследване е направено на пациента, с какъв хормон? Направете заключение въз основа на резултатите от изследването.

    Втора задача.

    Фиг. 1

    Фиг.2

    Фиг.3

    За установяване характера на палпиращата се формация в десния лоб на щитовидната жлеза (фиг. 1) е направена 131I сцинтиграфия (фиг. 2). Известно време след прилагането на хормона се повтаря сцинтиграфия (фиг. 3). Натрупването на 131I в десния лоб не се промени, в левия изчезна. Какво изследване е направено на пациента, с какъв хормон? Направете заключение въз основа на резултатите от изследването.

    За да се изследват местата на свързване, натрупване и метаболизъм на хормоните, те се маркират с радиоактивни атоми, въвеждат се в тялото и се използва авторадиография. Срезове от изследваната тъкан се поставят върху радиочувствителен фотографски материал, като рентгенов филм, проявява се и тъмните петна се сравняват със снимки на хистологични срезове.

    Изследване на съдържанието на хормони в биопроби

    По-често като биотестове се използват кръв (плазма, серум) и урина.

    Този метод е един от най-точните за оценка на секреторната активност на ендокринните органи и тъкани, но не характеризира биологичната активност и степента на хормонални ефекти в тъканите.

    Използват се различни изследователски техники в зависимост от химическата природа на хормоните, включително биохимични, хроматографски и биологични техники за тестване и отново радионуклидни техники.

    Сред радионуклидните медове има

      радиоимунен (RIA)

      имунорадиометричен (IRMA)

      радиорецептор (RRA)

    През 1977 г. Розалин Ялоу получава Нобелова награда за своите подобрения в техниките за радиоимуноанализ (RIA) за пептидни хормони.

    Радиоимуноанализът, който е най-разпространен днес поради високата си чувствителност, точност и простота, се основава на използването на хормони, маркирани с изотопи на йод (125I) или тритий (3H) и специфични антитела, които ги свързват.

    Защо е необходимо?

    Много кръвна захар При повечето пациенти с диабет инсулиновата активност в кръвта рядко е намалена, по-често тя е нормална или дори повишена

    Вторият пример е хипокалцемия. Паратиринът често е повишен.

    Радионуклидните методи позволяват да се определят фракции (свободни, свързани с протеини) на хормони.

    При радиорецепторния анализ, чиято чувствителност е по-ниска и информационното съдържание е по-високо от радиоимунния анализ, свързването на хормона се оценява не с антитела към него, а със специфични хормонални рецептори на клетъчните мембрани или цитозола.

    При изучаване на контурите на самоуправлението на хормоналната регулация в in vitro изследвания се използва определянето на пълния „набор“ от хормони с различни нива на регулиране, свързани с изследвания процес (либерини и статини, тропини, ефекторни хормони). Например, за щитовидната жлеза, тиротропин-освобождаващ хормон, тиротропин, трийодтирозин, тироксин.

    Първичен хипотиреоидизъм:

    T3, T4, TSH, TL

    Вторичен хипотиреоидизъм:

    T3, T4, TSH, TL

    Третичен хипотиреоидизъм:

    T3, T4, TSH, TL

    Относителна специфичност на регулирането: въвеждането на йод и диоидтирозин инхибира производството на тиротропин.

    Сравнението на физиологичната активност на кръвта, която тече в и от даден орган, ни позволява да идентифицираме секрецията на биологично активни метаболити и хормони в кръвта.

    Изследване на съдържанието на прекурсори и метаболити на хормоналния синтез в кръвта и урината

    Често хормоналният ефект до голяма степен се определя от активните метаболити на хормона. В други случаи прекурсорите и метаболитите, чиито концентрации са пропорционални на нивата на хормоните, са по-лесно достъпни за изследване. Методът позволява не само да се оцени хормонопродуциращата активност на ендокринната тъкан, но и да се идентифицират характеристиките на хормоналния метаболизъм.

    Мониторинг на пациенти с нарушена функция на ендокринните органи

    Това може да предостави ценна информация за физиологичните ефекти и ролята на хормоните на ендокринните жлези.

    Адисън Т. (Адисън Томас), английски лекар (1793-1860). Наричат ​​го бащата на ендокринологията. Защо? През 1855 г. той публикува монография, съдържаща по-специално класическо описание на хроничната надбъбречна недостатъчност. Скоро беше предложено да се нарече болестта на Адисон. Причината за болестта на Адисон най-често е първично увреждане на надбъбречната кора от автоимунен процес (идиопатична болест на Адисон) и туберкулоза.

    Методи за хистологично и хистохимично изследване на ендокринни тъкани

    Тези методи позволяват да се оценят не само структурните, но и функционалните характеристики на клетките, по-специално интензивността на образуване, натрупване и екскреция на хормони. Например, с помощта на хистохимични методи са открити феномените на невросекреция на невроните на хипоталамуса и ендокринната функция на предсърдните кардиомиоцити.

    Методи на генното инженерство

    Тези методи за реконструкция на генетичния апарат на клетката позволяват не само да се изследват механизмите на синтеза на хормоните, но и активно да се намесват в тях. Механизмите са особено обещаващи за практическо приложение в случаи на персистиращо нарушение на синтеза на хормони, както се случва при захарен диабет.

    Пример за експериментално използване на метода е изследване на френски учени, които през 1983 г. трансплантират ген, който контролира синтеза на инсулин в черния дроб на плъх. Въвеждането на този ген в ядрата на чернодробните клетки на плъх доведе до факта, че чернодробните клетки синтезират инсулин в рамките на един месец.

    Методологията за изследване на ендокринната система се състои от снемане на анамнеза, преглед на пациента, палпация, аускултация, лабораторни и инструментални методи на изследване, както общи, така и специални.

    За клиничен преглед важно условие е да се спазва последователността на изследване на ендокринните органи: хипофиза, щитовидна жлеза, паращитовидни жлези, панкреас, надбъбречни жлези, полови жлези.

    При събиране на анамнеза и преглед се обръща внимание на наличието или отсъствието на оплаквания и симптоми на пациента, характерни за патологията на определена ендокринна жлеза. Оплакванията и симптомите, показващи увреждане на ендокринните жлези, са много разнообразни, тъй като хормоните имат голямо влияние върху метаболизма, физическото и психическото развитие на детето, както и функционалното състояние на различни органи и системи на тялото на детето.

    Пациентите с патология на ендокринните жлези могат да имат оплаквания от повишена възбудимост, раздразнителност, неспокоен сън, изпотяване, промени в цвета на кожата, нарушен растеж на косата и ноктите, жажда и др.

    Пациенти с хиперфункция на еозинофилни клетки на предния дял на хипофизната жлеза могат да се оплакват от гигантски (над 190-200 cm) ръст (гигантизъм), непропорционално голяма дължина на крайниците, пръстите на ръцете и краката (акромегалия). Също така могат да се наблюдават груби черти на лицето, прогнатизъм, широки междини между зъбите и прекомерна кифоза на гръдния кош поради интензивния растеж на прешлените. Има и увеличение на надочните дъги, добре очертани мускули, но е характерна мускулна слабост.

    При хиперфункция на базофилните клетки на хипофизната жлеза родителите могат да се оплакват от значително увеличаване на телесното тегло, окосмяване по лицето при момичета (хирзутизъм), забавяне на растежа, което окончателно се определя при преглед на пациента.

    За хипофизната недостатъчност типичните оплаквания и симптоми са намаляване на ръста (с повече от 25% спрямо нормата), промени в изражението на лицето и "детски" черти на лицето, слабо развитие на мускулите, забавен или липсващ пубертет, малки размери на гениталиите. , мраморност на кожата, студени крайници. Комбинацията от тези симптоми с мастно-сексуални разстройства (долната част на тялото) е възможна при деструктивно увреждане на хипоталамо-хипофизната област.

    При хипертиреоидизъм може да има оплаквания от загуба на тегло, раздразнителност, прекомерна възбуда и подвижност, емоционална нестабилност, сърцебиене, повишена влажност на дланите и общо изпотяване, сърбеж по кожата, усещане за топлина (треска), болка в сърцето, сълзливост и усещане за болка в очите. При преглед можете да откриете треперене на пръстите, подуване на клепачите, треперене на затворени клепачи (симптом на Rosenbach), режещо мигане на клепачите (симптом на Stellwag), едно- или двустранен екзофталм, нарушена конвергенция на очите поради пареза на вътрешния прав мускул на окото (симптом на Мобиус), бяла ивица на склерата над ириса при гледане надолу (симптом на Грефе), при гледане нагоре

    (симптом на Kocher), бяла ивица склера около ириса, когато очите са отворени (симптом на Delrymple), "уплашен", фиксиран поглед на блестящи очи.

    При изследване на шията на здрави деца, особено по време на пубертета, можете да видите провлака на щитовидната жлеза. Ако има асиметрия в позицията на щитовидната жлеза, това показва наличието на възли. При дете с хипертиреоидизъм може да се наблюдава увеличение на щитовидната жлеза, степен I - разширяване на провлака, забележимо при преглъщане; II степен - разширяване на провлака

    и частици; III степен - "дебел врат" (фиг. 44); IV степен - изразено увеличение (гуша, рязко променя конфигурацията на шията) (фиг. 45); V степен - гуша с огромни размери.

    Трябва да се отбележи, че за разлика от други образувания на шията, щитовидната жлеза се смесва с трахеята по време на преглъщане.

    Пациентите с хипотиреоидизъм могат да получат ранно изоставане във физическото и умственото развитие, късно и неправилно никнене на зъбите, слюноотделяне, груб и дрезгав глас, хъркане при дишане, намален интерес към околната среда и летаргия.

    Когато изследвате болно дете, можете да наблюдавате забавяне в развитието на лицевите кости, седловиден нос, макроглосия, сив цвят на кожата, подпухнало лице, малки очи, дебели устни, чупливи нокти, рядка коса на главата, къс врат, крайници , пръсти (растежът на костите по дължина е ограничен, няма ширина).

    Хиперфункцията на паращитовидните жлези води до намален апетит или дори анорексия, гадене, повръщане, запек, болки в костите, мускулна слабост, фрактури на костите, жажда, полидипсия, полиурия, депресия и увреждане на паметта.

    Анамнезата на пациенти с хипопаратироидизъм включва високо тегло при раждане, бавна загуба на остатъка от пъпната връв, хронична диария, която често се променя със запек, забавяне на развитието, фотофобия, конвулсии, прекомерна възбуда и ларингоспазъм. По време на прегледа могат да се появят незадължителни симптоми: спазъм на клепачите, конюнктивит, мътна леща на окото, кариес, тънки нокти, нарушения в пигментацията на косата.

    При съмнение за захарен диабет е необходимо да се установи дали детето има повишен апетит (полифагия), жажда (полидипсия) и повишено уриниране (полиурия). В същото време могат да се наблюдават така наречените леки симптоми на захарен диабет - невродермит, пародонтоза, фурункулоза, сърбеж в гениталната област. В по-късните етапи, поради кето ацидоза, апетитът намалява, децата бързо се уморяват, учат по-лошо, стават летаргични и слаби. Нощна и дневна енуреза, появява се светла урина, след което по бельото остават петна от нишесте, парестезия на краката, зрителната острота намалява и могат да се появят ксантоми по дланите.

    При кърмачетата трябва да се обърне внимание на ниско тегло при раждане, загуба на тегло (хипотрофия), пиодермия и често подремване.

    Адреногениталният синдром е проява на вродена вирилизираща хиперплазия на надбъбречната кора. Анамнезата и прегледът на пациента разкриват псевдохермафродитизъм (уголемяване на клитора, големите срамни устни, анормално развитие на уретрата, подобно на хипоспадия). По-късно се наблюдава мъжки тип тяло, хирзутизъм, нисък глас и акне. Момчетата могат да имат макрогенитозомия (на 2-3 години), неестествено преждевременно сексуално развитие. Децата и от двата пола могат да получат висок растеж, повишена мускулна сила и ускорено съзряване на скелета. В по-тежки случаи се отбелязват признаци на адреногенитален синдром със загуба на соли (синдром на Debreu-Fibiger). Горепосочените прояви на заболяването включват загуба на тегло, бавно наддаване на тегло и ексикоза. Хипертермията и хипертонията са по-редки.

    При пациенти с потвърдена хиперплазия на хипофизната жлеза на надбъбречната кора се диагностицира болестта на Иценко-Кушинг. При синдрома на Кушинг надбъбречните жлези произвеждат прекомерно кортизол (в по-малка степен алдостерон и андрогени). Такива пациенти се оплакват и при преглед се наблюдават забавяне на растежа, „мършави“ ръце, промени в изражението на лицето и лунообразно лице с пурпурночервена кожа. Кожата на тялото и крайниците е суха с множество лилаво-цианотични стрии от атрофичен произход. Можете да наблюдавате хипертрихоза, акне, пиодерма, микоза. При момичетата вторичните полови белези се обръщат и цикличността на менструацията се нарушава. В по-късните етапи могат да се появят оплаквания от недохранване или мускулна атрофия, недоразвитие на гениталните органи и високо кръвно налягане.

    При недостатъчна функция на надбъбречната жлеза с хроничен ход (производството на кортизол, алдостерон и андрогени намалява), пациентите изпитват класическата триада от признаци, характерни за болестта на Адисън - адинамия, пигментация, хипотония. Пациентите се оплакват от слабост, умора, намалена подвижност и намален апетит. Характеризира се с чревна обструкция. Развиват се загуба на тегло, сънливост и мускулна слабост. При някои пациенти първата проява на заболяването е кафява пигментация на кожата и лигавиците на устната кухина (чрез прекомерно производство на меланоцит-стимулиращ хормон от хипофизната жлеза). Пигментацията се простира до шията, лакътните стави, бялата линия, гениталиите, твърдото небце и вътрешната повърхност на бузите. При остро увреждане на надбъбречните жлези пациентите се оплакват от силна слабост, коремна болка, повръщане и диария.

    Много важен елемент от прегледа е оценката на половото развитие на детето. За целта при момичетата внимателно се изследват млечните жлези и пубисното окосмяване, а при момчетата - развитието на пениса и тестисите, както и степента на пубисното окосмяване. Идентифицираните вторични полови белези и тяхното развитие трябва да се определят според класификацията, предложена от JMTanner през 1962 г. И за момичета и за момчета.

    При деца с преждевременно сексуално развитие (до 8 години при момичета и до 10 години при момчета) комплексът от симптоми включва значително ускоряване на растежа, ранна поява на огнища на осификация в костите, преждевременна синостоза, в резултат на което тялото не достига пълно развитие. Умствените способности отговарят на възрастовите изисквания. Сперматогенезата се появява рано при момчетата и менструацията при момичетата, уголемяване и окосмяване на гениталните органи. На фона на обща апатия и летаргия може да се наблюдава сексуална възбудимост. Нистагъм, птоза и необичайна походка не се наблюдават често.

    В анамнезата и при преглед на пациента хипогонадизмът (забавено полово развитие за 2 или повече години) разкрива истинска гинекомастия, структура на тялото като на евнух (тесен гръден кош, липса на коса, непропорционално дълги крака, много малко лицево окосмяване, гинекомастия, обърнати зърна , недостатъчно развитие на вторични полови белези). Такива деца растат високи, имат висок глас, недостатъчно развитие на ларинкса, мускулите, гениталиите и вторичните полови белези.

    Палпацията е важна за диагностициране на лезии на ендокринните жлези. Не всички жлези обаче са достъпни за палпиране.

    Палпацията се извършва по общоизвестни правила (топли, чисти ръце, правилна позиция на лекаря и пациента, без непознати; без да причиняват ненужно страдание на пациента, те първо се палпират повърхностно, а след това по-дълбоко).

    Палпацията на провлака на щитовидната жлеза се извършва чрез плъзгащи се движения на палеца, показалеца и средния пръст на дясната ръка нагоре от дръжката на гръдната кост.

    За да палпирате десния и левия лоб на щитовидната жлеза, е необходимо да поставите II-V огънатите пръсти на двете ръце зад задните ръбове, а палецът зад предните ръбове на стерноклеидомастилния мускул. След това детето се иска да отпие, по време на което щитовидната жлеза ще се движи заедно с ларинкса. В същото време се определят повърхността, консистенцията, подвижността, размерът и болката на органа.

    Десният и левият лоб на щитовидната жлеза се палпират безболезнено под формата на меки, нежни образувания с гладка повърхност.

    С помощта на палпация се изясняват характеристиките на сексуалните разстройства, по-специално при палпиране на външните гениталии, техния размер, степента на намаляване (увеличаване), броя на тестисите в скротума, тяхната плътност и местоположението на тестис при крипторхизъм се определят. Оценява се дебелината на подкожния мастен слой, температурата на кожата на крайниците, мускулния тонус и сила, тяхната консистенция. Често при пациенти с патология на ендокринните жлези се палпира увеличен черен дроб и се определя неговата болезненост.

    Перкусията при деца със заболявания на ендокринната система може да открие болка в костите с хиперпаратироидизъм, намаляване на размера на относителната тъпота на сърцето с хипогонадизъм, увеличен черен дроб със захарен диабет, както и гуша, разположена в тимуса, който се определя над дръжката на гръдната кост.

    Аускултацията при пациенти с тиреотоксикоза може да слуша съдов шум над повърхността на жлезата; отслабени сърдечни тонове и систоличен шум на върха му с надбъбречна недостатъчност.

    За диагностициране на заболявания на ендокринната система е необходимо да се използват специални лабораторни изследвания, а именно определяне на съдържанието на хормони в различни биологични течности.

    Въз основа на определянето на нивото на тези хормони може да се направи заключение за естеството на дисфункцията на съответните ендокринни жлези.

    Ендокринната система или системата за вътрешна секреция се състои от жлези с вътрешна секреция, наречени така, защото отделят специфични продукти от своята дейност - хормони - директно във вътрешната среда на тялото, в кръвта. В тялото има осем от тези жлези: щитовидна, паращитовидна или паращитовидна, гуша (тимус), хипофиза, епифиза (или епифизна жлеза), надбъбречни жлези (надбъбречни жлези), панкреас и полови жлези (фиг. 67).

    Общата функция на ендокринната система се свежда до осъществяване на химична регулация в организма, установяване на връзки между неговите органи и системи и поддържане на техните функции на определено ниво.

    Хормоните на ендокринните жлези са вещества с много висока биологична активност, тоест те действат в много малки дози. Заедно с ензимите и витамините те принадлежат към така наречените биокатализатори. Освен това хормоните имат специфично действие - някои от тях влияят на определени органи, други контролират определени процеси в тъканите на тялото.

    Жлезите с вътрешна секреция участват в процеса на растеж и развитие на организма, в регулирането на метаболитните процеси, които осигуряват неговата жизнена дейност, в мобилизирането на силите на организма, както и във възстановяването на енергийните ресурси и обновяването на неговите клетки и носни кърпи. По този начин, в допълнение към нервната регулация на жизнената дейност на тялото (включително по време на спорт), има ендокринна регулация и хуморална регулация, които са тясно свързани и се осъществяват чрез механизъм за „обратна връзка“.

    Тъй като физическото възпитание и особено спортът изискват все по-напреднала регулация и корелация на дейностите на различни човешки системи и органи в трудни условия на емоционален и физически стрес, изследването на функцията на ендокринната система, макар и все още да не е включено в широката практика, постепенно започва да заема все по-важно място в комплексните изследвания на спортистите.

    Правилната оценка на функционалното състояние на ендокринната система ни позволява да идентифицираме патологични промени в нея в случай на нерационално използване на физически упражнения. Под влияние на рационалното, системно физическо възпитание и спорт тази система се усъвършенства.

    Адаптирането на ендокринната система към физическата активност се характеризира не просто с повишаване на активността на ендокринните жлези, а главно с промяна в отношенията между отделните жлези. Развитието на умора при продължителна работа е съпроводено и със съответните промени в дейността на жлезите с вътрешна секреция.

    Човешката ендокринна система, която се подобрява под въздействието на рационално обучение, спомага за повишаване на адаптивните възможности на тялото, което води до подобряване на спортните постижения, по-специално в развитието на издръжливостта.

    Изследването на ендокринната система е комплексно и обикновено се извършва в болнични условия. Но има редица прости методи за изследване, които позволяват до известна степен да се оцени функционалното състояние на отделните ендокринни жлези - анамнеза, преглед, палпация, функционални тестове.

    анамнеза. Важна е информацията за периода на пубертета. Когато разпитват жените, те откриват началния час, редовността, продължителността, изобилието на менструацията, развитието на вторични полови белези; при разпит на мъже, времето на започване на загуба на глас, окосмяване по лицето и т.н. За по-възрастните хора, времето на настъпване на менопаузата, т.е. времето на спиране на менструацията при жените, състоянието на сексуалната функция при мъжете.

    Информацията за емоционалното състояние е от съществено значение. Например, бързи промени в настроението, повишена възбудимост, тревожност, обикновено придружени от изпотяване, тахикардия, загуба на тегло, субфебрилна температура и умора, могат да показват повишена функция на щитовидната жлеза. При намаляване на функцията на щитовидната жлеза се наблюдава апатия, която е придружена от летаргия, забавяне, брадикардия и др.

    Симптомите на повишена функция на щитовидната жлеза понякога са почти идентични със симптомите, които се появяват при претрениране на спортист. Този аспект от историята трябва да бъде особено важен, тъй като при спортисти са наблюдавани случаи на повишена функция на щитовидната жлеза (хипертиреоидизъм).

    Установете наличието на оплаквания, характерни за пациентите с диабет - повишена жажда и апетит и др.

    инспекция. Обърнете внимание на следните признаци: пропорционалността на развитието на отделните части на тялото при високи хора (има ли непропорционално увеличение на носа, брадичката, ръцете и краката, което може да показва хиперфункция на предния лоб на хипофизната жлеза - акромегалия), наличие на изпъкнали очи, изразен блясък в очите (наблюдаван при хипертиреоидизъм), подпухналост на лицето (отбелязано при хипотиреоидизъм), както и признаци като увеличена щитовидна жлеза, изпотяване или суха кожа, наличие на мазнини (преобладаващото отлагане на мазнини в долната част на корема, задните части, бедрата и гърдите е характерно за затлъстяването, свързано с дисфункция на хипофизната жлеза и половите жлези), внезапна загуба на тегло (възниква при тиреотоксикоза, заболявания на хипофизата - болест на Simmonds и надбъбречните жлези - Болест на Адисон).

    Освен това по време на прегледа се определя окосмяването по тялото, тъй като растежът на косата зависи до голяма степен от хормоналните влияния на половите жлези, щитовидната жлеза, надбъбречната жлеза и хипофизата. Наличието на окосмяване при мъжете, характерно за жените, може да показва недостатъчност на функцията на половите жлези. Мъжкият тип коса при жените може да бъде проява на хермафродитизъм - наличието в един индивид на характеристики, характерни за двата пола (такива лица нямат право да спортуват).

    Прекомерното окосмяване по тялото и крайниците, а при жените и по лицето (мустаци и брада) предполага тумор на надбъбречната кора, хипертиреоидизъм и др.

    палпация. От всички ендокринни жлези, щитовидната жлеза и мъжките репродуктивни жлези могат да бъдат директно палпирани (както и изследвани); при гинекологичен преглед - женски полови жлези (яйчници).

    Функционални тестове. При изследване на функцията на ендокринните жлези се използват много такива тестове. От голямо значение в спортната медицина са функционалните тестове, използвани при изследване на щитовидната жлеза и надбъбречните жлези.

    Функционалните тестове при изследване на функцията на щитовидната жлеза се основават на изследването на метаболитните процеси, регулирани от тази жлеза. Хормонът на щитовидната жлеза - тироксинът стимулира окислителните процеси, като участва в регулирането на различни видове метаболизъм (въглехидратен, мастен, йоден метаболизъм и др.). Следователно, основният метод за изследване на функционалното състояние на щитовидната жлеза е определянето на основния метаболизъм (количеството енергия в килокалории, консумирано от човек в състояние на пълна почивка), което е в пряка зависимост от функцията на щитовидната жлеза. и количеството секретиран от него тироксин.

    Стойността на основния метаболизъм в килокалории се сравнява с правилните стойности, изчислени с помощта на таблиците или номограмите на Харис-Бенедикт, и се изразява като процент от правилната стойност. Ако базалният метаболизъм на изследвания спортист надвишава очаквания с повече от +10%, това предполага хиперфункция на щитовидната жлеза, ако е под 10%, нейната хипофункция. Колкото по-висок е процентът на излишък, толкова по-изразена е хиперфункцията на щитовидната жлеза. При значителен хипертиреоидизъм основната метаболитна скорост може да бъде по-голяма от +100%. Намаляването на основния метаболизъм с повече от 10% в сравнение с нормалното може да означава хипофункция на щитовидната жлеза.

    Функцията на щитовидната жлеза може да се изследва и с помощта на радиоактивен йод. Това определя способността на щитовидната жлеза да го абсорбира. Ако повече от 25% от въведения йод остава в щитовидната жлеза след 24 часа, това показва повишаване на нейната функция.

    Функционалните тестове при изследване на надбъбречната функция дават ценни данни. Надбъбречните жлези имат широк спектър от ефекти върху тялото. Надбъбречната медула, отделяща хормони - катехоламини (адреналин и норепинефрин), комуникира между ендокринните жлези и нервната система, участва в регулирането на въглехидратния метаболизъм, поддържа съдовия тонус и сърдечните мускули. Кората на надбъбречната жлеза секретира алдостерон, кортикостероиди и андрогенни хормони, които играят жизненоважна роля за функционирането на тялото като цяло. Всички тези хормони участват в минералния, въглехидратния, протеиновия метаболизъм и в регулацията на редица процеси в организма.

    Напрегнатата мускулна работа подобрява функцията на надбъбречната медула. По степента на това увеличение може да се съди за ефекта от натоварването върху тялото на спортиста.

    За определяне на функционалното състояние на надбъбречните жлези, химичния и морфологичен състав на кръвта (количеството на калий и натрий в кръвния серум, броят на еозинофилите в кръвта) и урината (определяне на 17-кетостероиди и др.) се изследва.

    При тренирани спортисти след натоварване, съответстващо на нивото им на подготовка, се наблюдава умерено повишаване на надбъбречната функция. Ако натоварването надвишава функционалните възможности на спортиста, хормоналната функция на надбъбречните жлези се потиска. Това се установява чрез специално биохимично изследване на кръв и урина. При надбъбречна недостатъчност метаболизмът на минералите и водата се променя: нивото на натрий в кръвния серум намалява и количеството на калий се увеличава.

    Без перфектна, координирана функция на всички ендокринни жлези е невъзможно да се постигнат високи спортни постижения. Очевидно различните видове спорт са свързани с преобладаващо засилване на функцията на различните ендокринни жлези, тъй като хормоните на всяка жлеза имат специфично действие.

    При развитието на качеството на издръжливостта основна роля играят хормоните, които регулират всички основни видове метаболизъм; при развитието на качествата на скоростта и силата е важно повишаването на нивото на адреналина в кръвта.

    Актуална задача на съвременната спортна медицина е изследването на функционалното състояние на ендокринната система на спортиста, за да се изясни нейната роля за повишаване на работоспособността му и предотвратяване на развитието на патологични промени както в самата ендокринна система, така и в други системи и органи (тъй като дисфункцията на ендокринната система засяга организма като цяло).

    Глава 15. ЗАКЛЮЧЕНИЕ ОТ РЕЗУЛТАТИТЕ ОТ МЕДИЦИНСКИЯ ПРЕГЛЕД.

    Медицинският преглед на спортист и спортист, както първичен, така и повторен и допълнителен, трябва да завърши с медицински доклад.

    Въз основа на данните, получени при изследването на анамнезата, физическото развитие, здравословното и функционалното състояние, както и данните от инструменталните и лабораторни изследвания и заключенията на специалисти по отделни органи и системи (офталмолог, невролог и др.), спортният терапевт трябва да направи определени заключения и да даде съответното заключение.

    Първичният медицински преглед задължително включва всички горепосочени елементи. При повторни и допълнителни прегледи, инструментални, лабораторни изследвания и консултации със специалисти се извършват само при необходимост и само тези, които наблюдаващият лекар-клиницист намери за необходимо да предпише. Това обуславя различния характер на медицинското становище при първоначалните, повторните и допълнителните прегледи на спортист или спортист. Въпреки това, независимо от това какъв вид медицински преглед се извършва, медицинският доклад трябва да съдържа следните пет раздела: 1) оценка на здравословното състояние, 2) оценка на физическото развитие, 3) оценка на функционалното състояние, 4) препоръки към спортиста относно дневния режим, храненето и др. и 5) препоръки към треньора и учителя за индивидуализация на тренировъчния процес и тренировъчен режим.

    Здравна оценка.От тази оценка по време на първоначалния медицински преглед основно зависи допускането на дадено лице до спорт или само до развлекателна физическа култура. За да постави диагноза „здравословен“, лекарят е длъжен да изключи всички възможни патологични промени в тялото, които са противопоказание за спортуване. За да постави уверено такава диагноза, той използва целия арсенал от съвременни диагностични средства.

    Ако диагнозата „здравословен“ е извън съмнение и се потвърждава от всички по-нататъшни изследвания, изследваното лице получава разрешение да спортува и препоръки с какви спортове да се занимава. Тези препоръки са дадени въз основа на всички данни, получени по време на изследването, разкриващи характеристиките на физиката, конституцията, функционалното състояние и т.н., като се вземат предвид спецификите на тренировъчния процес в конкретен спорт, който изисква определени индивидуални характеристики които спортният лекар трябва да знае добре.

    Ако лицето, което се изследва, няма право да се занимава със спорт, за което трябва да има абсолютни противопоказания, лекарят е длъжен да даде препоръки относно физическото възпитание, като посочи техния характер и допустимите дози на физическата активност.

    Абсолютни противопоказания за спорт са различни хронични заболявания (сърдечни заболявания, хронични заболявания на белите дробове, черния дроб, стомаха, червата, бъбреците и др.), физически дефекти (например отстранен бял дроб или бъбрек), които не могат да бъдат излекувани. Лекарят се ръководи от инструкции, определящи противопоказанията за упражняване на определени спортове, както и официални инструкции, одобрени от Министерството на здравеопазването на СССР, определящи изискванията, на които трябва да отговаря здравето на спортист, който влиза във висше учебно заведение за физическо възпитание.

    В допълнение към абсолютните противопоказания за спорт, има така наречените относителни противопоказания - дефекти в здравето или физическото развитие, които възпрепятстват участието само в един спорт. Например, перфорация на тъпанчето поради предишно възпаление на средното ухо е противопоказание за водни спортове, но не пречи на участието във всички други видове; Плоските стъпала са относително противопоказание само за вдигане на тежести. При някои постурални нарушения (например прегърбване, заоблен гръб) не се препоръчва да се занимавате със спортове, при които тези дефекти могат да се влошат (например колоездене, гребане, бокс), но се препоръчват спортове, естеството на тренировъчния процес. в който помага да се коригират тези дефекти.

    За спортистите, в допълнение към тези противопоказания, има временни противопоказания за спортуване - по време на заболяване (до пълно възстановяване). Тези заболявания включват огнища на хронична инфекция, които може да не предизвикват оплаквания и да не притесняват спортиста за определен период от време.

    Огнища на хронична инфекция са хронични заболявания на отделни органи (зъбен кариес, хронично възпаление на фарингеалните сливици, жлъчния мехур, параназалните кухини, яйчниците и др.), Които не се проявяват активно (няма изразени оплаквания или клинични симптоми), докато тялото е в състояние да потисне постоянната интоксикация, произтичаща от тях. Въпреки това, при най-малкото намаляване на защитните сили на тялото, тези лезии могат да причинят усложнения в други органи. При навременно лечение и отстраняване на огнища на хронична инфекция, патологичните промени, които причиняват в други органи и системи, изчезват, ако в тях все още не са се развили необратими промени.

    Учителят и треньорът трябва да се уверят, че спортистът следва всички инструкции на лекаря и продължава лечението.

    При повторни и допълнителни медицински прегледи се дава заключение за промените в здравето, настъпили под въздействието на физическото възпитание и спорта - както положителни, така и възможни отрицателни (в случай на нерационално използване на физическа активност).

    Оценка на физическото развитие.Въз основа на данни, получени с помощта на различни методи за изследване и оценка на физическото развитие, се дава общо заключение за физическото развитие (средно, високо или ниско физическо развитие), посочват се съществуващите му дефекти, по-специално лоша поза, изоставане в определени параметри на физическото развитие, без да се вземе предвид, че е невъзможно правилното конструиране на процеса на обучение. Физическите упражнения трябва да са насочени не само към повишаване на функционалното състояние на ученика, но и към премахване на идентифицираните дефекти във физическото развитие, които могат да окажат неблагоприятно въздействие върху здравето, ако не бъдат елиминирани. По този начин лошата стойка (навеждане, сколиоза), влошаване на функционалното състояние на външните дихателни пътища и сърдечно-съдовата система, може да допринесе за появата на заболявания на тези системи.

    Повтарящите се изследвания на физическото развитие позволяват да се оцени въздействието на системното обучение както върху морфологичните, така и върху функционалните показатели на физическото развитие, да се идентифицират положителни и отрицателни (в случаите, когато класовете са проведени без да се вземат предвид промените, които лекарят посочи в заключението по време на първоначалния преглед) промени във физическото развитие.

    Оценка на функционалното състояние.За да спортувате, тоест да извършвате тежки физически натоварвания, трябва не само да сте абсолютно здрави и добре физически развити, но и да сте добре функционално подготвени. Следователно третият раздел на медицинския доклад е оценката на функционалното състояние на субекта. Дава се въз основа на резултатите от изследване, използващо функционални диагностични методи, проведено по време на първоначалния медицински преглед. При повторни и допълнителни медицински прегледи лекарят определя промените във функционалното състояние на спортиста. Въз основа на задълбочени изследвания с помощта на методи за функционална диагностика се прави заключение за подобряване или влошаване на функционалното състояние. Подобряването му обикновено показва повишаване на нивото на обучение. В допълнение, резултатите от проучванията, проведени по време на обучение и състезания (данни от медицински и педагогически наблюдения - вижте по-долу), дават на треньора представа за състоянието (подобряване или влошаване) на специалното обучение.

    При многократни прегледи лекарят може да констатира състояние на претрениране, което възниква в резултат на претоварване на централната нервна система с прекомерна и монотонна физическа активност, причиняваща невроза. Може да определи дали спортистът е преуморен. Проучването на периода на възстановяване след тренировки и състезания разкрива липсата на възстановяване на функциите на различни системи на тялото след предишни натоварвания. Неуспехът да се отчетат адекватно тези данни може да доведе до пренапрежение на тези системи, които са имали някакви аномалии и са били особено стресирани. Това се отнася по-специално за сърцето: при спортист, при липса на каквито и да е оплаквания и намаляване на производителността, се откриват отклонения на ЕКГ, което показва несъответствие между нивото на неговата подготовка и натоварването, което се изпълнява. Ако не обърнете внимание на това, могат да настъпят дълбоки негативни промени в сърдечния мускул, което да доведе до нарушаване на неговата функция.

    В зависимост от степента на функционална готовност на учениците, учителят и треньорът индивидуализират физическата им активност.

    Трябва да се има предвид, че нивото на функционално състояние се определя само чрез цялостен преглед на спортиста. Както вече споменахме, не трябва да се правят далечни заключения въз основа на изследването само на един показател, дори и този, който изглежда много информативен. Характерът на набора от показатели, използвани при изследване на спортист или физически атлет, не трябва да бъде стандартен. Всеки път се определя от задачата, която стои пред лекаря.

    Правилната оценка от лекар на здравословното състояние, физическото развитие и функционалното състояние на тялото на спортиста помага на треньора и учителя правилно да оценят състоянието на фитнес и въз основа на това рационално да изградят тренировъчния процес.

    Повишаването на функционалното състояние на тялото на спортиста се характеризира с икономия на дейността на всички системи в покой, по-икономична адаптация към стандартните натоварвания, а при максимални физически натоварвания - възможността за максимално подобряване на функциите на тялото.

    С подобряването на функционалното състояние на сърдечно-съдовата система се отбелязва забавяне на сърдечната честота; леко понижение на кръвното налягане в покой и според данните от ЕКГ умерено забавяне на атриовентрикуларната проводимост (PQ),подобряване на зъбците РИ T,намаляване на зъбите R,скъсяване на електрическата систола (QT);увеличаване на амплитудата на вълните на рентгеновата кимограма; според поликардиографското изследване - икономия на контрактилната функция.

    Подобряването на функционалното състояние на сърдечно-съдовата система, разкрито в проучвания с използване на стандартни тестове, велоергометрия и др., се изразява в намаляване на реакцията на пулса и кръвното налягане при натоварвания за издръжливост и сила и повишаване на реакцията при скоростни натоварвания , което показва мобилизиращата способност на тялото. Отговорът на функционалните тестове обикновено е нормотоничен с добро количествено съотношение между пулса и артериалното налягане и бързото им възстановяване.

    С повишаване на функционалното състояние на външната дихателна система, дихателната честота намалява, силата на дихателните мускули се увеличава, действителният жизнен капацитет на белите дробове значително надвишава трябва, максималната белодробна вентилация се увеличава, показателите на функционалните тестове на външната дихателна система се подобрява, спортистът става по-устойчив на намаляване на насищането на артериалната кръв с кислород, скоростта забавя кръвния поток (според данните от оксиметрията).

    С повишаване на функционалното състояние на нервната и нервно-мускулната система се подобрява ефективността на координационните тестове, както и тестовете за изследване на вестибуларния апарат, вегетативната нервна система, увеличава се силата на различни мускулни групи, амплитудата между мускулното напрежение и релаксация (според миотонометрията), двигателната реобаза и хронаксия намаляват, показателите на мускулите-антагонисти и т.н. се сближават.

    След претърпени наранявания и заболявания спортистите и спортистите са длъжни да преминат допълнителен медицински преглед, който определя точното време за допускане до спортно обучение и физическо възпитание и тяхната интензивност по отношение на конкретно лице. Минали заболявания или наранявания винаги намаляват нивото на функционално състояние на спортист и физически спортист. В тези случаи дори малко физическо натоварване за даден спортист може да не отговаря на функционалните му възможности в момента и да предизвика неблагоприятни промени в различни органи и системи. Без допълнителен медицински преглед треньорът и учителят нямат право да допускат състезателя до тренировка. В противен случай това може да доведе до рецидив на заболяването, а понякога и до сериозни усложнения.

    Когато функционалното състояние се влоши под въздействието на нерационална, прекомерна физическа активност, всички тези показатели се променят в обратна посока.

    Много важни за треньора и учителя са онези раздели от медицинския доклад, в които лекарят дава препоръки на спортиста за режима, а на треньора и учителя за индивидуализацията на тренировъчните натоварвания и тренировъчния режим.

    В края на протокола лекарят трябва да посочи срока за явяване на повторен медицински преглед. Треньорът и учителят са отговорни да гарантират, че спортистът следва тази инструкция.

    Има разделение на медицински групи от ученици от училища, техникуми и университети, членове на началните групи по физическо възпитание и тези, които участват в здравни групи. Това разделение е предвидено от държавната програма за физическо възпитание. За възрастните хора програмата е малко по-различна, но не и фундаментално различна от общоприетата.

    Треньорите и учителите, работещи с ученици по държавните програми за физическо възпитание, трябва да знаят към коя медицинска група принадлежат техните ученици.

    Въз основа на здравословното състояние, физическото развитие и функционалната готовност, участващите в програмата за физическо възпитание, както и членовете на началните групи по физическо възпитание, се разделят на три медицински групи - основна, подготвителна и специална.

    Основната медицинска група включва хора с добро функционално състояние и без отклонения в здравето или физическото развитие. В допълнение към пълните часове по програмата за физическо възпитание, те имат право да се подготвят за преминаване и изпълнение на стандартите GTO. Освен това лекарят им дава препоръки относно участието във всяка спортна секция и разрешение за участие в състезания по този спорт, при условие че са достатъчно подготвени.

    Подготвителната група включва ученици с леки отклонения в здравето, недостатъчно функционално състояние и слабо физическо развитие. Усвояват същата програма за физическо възпитание, но по-постепенно. Стандартите, по които се отчита тяхното представяне, са разработени, като се вземат предвид отклоненията, които всеки от тях има. Забранено им е да участват в допълнителни спортни секции. Назначените към тази група могат да се занимават с обща физическа подготовка и постепенно да се подготвят за изпълнение на стандартите на комплекса GTO. С подобряване на здравето, физическото развитие и функционалното състояние тези ученици могат да бъдат прехвърлени от подготвителна група в основна група.

    Специална медицинска група включва лица със значителни отклонения (постоянни или временни) в здравословното състояние и физическото развитие. Занятията с тях са структурирани по специални програми, като се вземат предвид съществуващите отклонения и се провеждат под постоянно медицинско наблюдение. При необходимост те се изпращат на курсове по физиотерапия в лечебни заведения.

    Треньорът и учителят получават писмено медицинско заключение за спортист или физически възпитател. При възможност, а в националните отбори е задължително, лекарските становища се обсъждат заедно с учителя.

    Въз основа на медицинско заключение, обучителят и учителят правят необходимите корекции в системата на обучение. Посочените в него препоръки са задължителни и изискват системно наблюдение. Това не освобождава лекаря от задължението периодично да проверява изпълнението на неговите препоръки. Основните разпоредби на медицинското заключение, които са пряко свързани с тренировъчния процес, са включени в индивидуалния тренировъчен план на спортиста. При повторни медицински прегледи се проверява правилността на тренировъчния процес и физическите упражнения.

    Мнението на лекаря помага да се даде задълбочена оценка на работата на треньора и учителя. В края на краищата, неговата ефективност се определя не само от такива важни критерии като повишеното спортно майсторство, броят на обучените висококвалифицирани спортисти, но и от комбинацията от постижения на високо спортно майсторство с повишаване и укрепване на здравето на спортиста и липсата на отрицателни промени. Само при това условие можем да говорим за ефективността и целесъобразността на методологията на обучение, използвана от треньора и учителя.

    Необходимостта от внимателно извършване на медицинско мнение сега е станала още по-интензивна поради използването на много интензивна физическа активност в спортните тренировки. Използването на такива натоварвания е необходимо за постигане на високи резултати, характерни за съвременния спорт. Това изисква внимателно спазване на всички медицински препоръки. Отклонението от условията, определени от лекаря при използване на интензивни натоварвания, ги прави прекомерни, което може да бъде вредно за здравето на спортиста.

    При високи натоварвания е необходимо внимателно да се следи тяхното въздействие върху тялото, за да се предотвратят своевременно възможните им отрицателни ефекти. Ако повишаването на спортното майсторство и спортните резултати е придружено от влошаване на здравето, използваният метод на обучение не е рационален.

    Използването на този вид натоварване изисква абсолютно здраве, тяхната ясна индивидуализация, редовност и постепенно увеличаване, достатъчна почивка между класовете, стриктно спазване на режима и др. (Не трябва например да комбинирате тежка физическа активност с интензивна умствена дейност) , внимателно системно медицинско наблюдение.

    Стриктното спазване на тези изисквания предотвратява евентуално претоварване и осигурява висока ефективност на такива товари.


    Федерална агенция за образование на Руската федерация
    Държавно образователно заведение за висше професионално образование Башкирски държавен университет
    Катедра по биология
    Катедра по биохимия

    Курсова работа
    Методи за изследване на ендокринната система в нормални и патологични състояния

    Завършено:
    Студент 5-та година OSE
    Група А
    Усачев С. А.

    Уфа 2010 г
    Съдържание
    Въведение…………………………………………………………………4
    1. Преглед на методите за изследване на ендокринната система
    нормални и патологични…………………………………………………………………6
    1.1. Кратка историческа скица……………………………………………………...6
    1.2. Преглед на съвременните методи за изследване на ендокринната система..12
    1.3. Съвременни методи за изследване на ендокринната система
    пример за изследване на щитовидната жлеза……………………………28
    2. Проблеми и перспективи на ендокринните методи за изследване
    системи………………………………………………………………………45
    Заключение………………………………………………………………..58
    Списък на използваната литература…………………………………………………59

    Списък на съкращенията, приети в работата
    AOK – антитялообразуващи клетки
    AG – антиген
    АКТХ - адренокортикотропен хормон
    HPLC – високоскоростна течна хроматография
    HI – компенсаторна хиперинсулинемия
    ДНК – дезоксирибонуклеинова киселина
    LC – течна хроматография
    ELISA - ензимен имуноанализ
    IR – инсулинова резистентност
    CT – компютърна томография
    LH – лутеинизиращ хормон
    МС – метаболитен синдром
    ЯМР - ядрено-магнитен резонанс
    PCR - полимеразна верижна реакция
    RIA – радиоимуноанализ
    DHT – реакция на свръхчувствителност от забавен тип
    DM 2 – захарен диабет тип 2
    TSH – тиреоиден стимулиращ хормон
    Т4 – тироксин
    Т3 – трийодтиронин
    TBG – тест за тироксин-свързващ глобулин
    Ехография – ултразвуково изследване
    FIA – флуоресцентен имуноанализ
    Цветно доплерово картографиране
    ЦНС - централна нервна система
    щитовидна жлеза - щитовидна жлеза

    Въведение
    През последните няколко години, в резултат на развитието на по-фини, чувствителни и специфични методи за определяне на хормони и други методи за изследване на ендокринната система при здраве и заболяване, клиничната ендокринология и биохимия до голяма степен се трансформира от вид изкуство в клон на приложната химия, физиология, физика и генетика. Този напредък стана възможен благодарение на въвеждането в практиката на голям брой нови и високотехнологични методи за изследване на ендокринната система, изолирането и последващото биологично и биохимично характеризиране на различни високо пречистени полипептидни хормони, стероиди, витамини, производни на малки полипептиди и аминокиселини, които се класифицират като хормони, както и производството на радиоактивно маркирани атоми на хормони с висока специфична активност.
    Уместност на темата:
    В момента, на прага на разбирането на най-скритите и мистериозни явления на живия организъм, най-важната задача е да се намерят най-надеждните, достъпни и високотехнологични методи за изследване. Новата ера на нанотехнологиите и високоспециализираните открития започва да дава своя принос в биологичната химия, която отдавна използва методи не само за химичен анализ, но и най-модерните технологии във всички клонове на физиката, компютърните науки, математиката и други науки. Времето диктува своите условия на човечеството - да опознае по-дълбоко, да опознае задълбочено, да открие причината за процесите, протичащи в живия организъм в нормални и патологични условия. Търсенето на нови методи за изследване не спира и ученият просто няма време да обобщи, систематизира тази област на познанието или да подчертае това, от което се нуждае в момента. Освен това, когато изучавах проблема с изследването на ендокринната система, не намерих достатъчно пълен, обобщаващ наръчник по тази тема. Много изследователи, по-специално биохимици, са изправени пред проблема за търсене и систематизиране на съвременни методи за изследване на ендокринната система при здраве и болест. Това се дължи преди всичко на факта, че всеки ден се появяват нови източници на литература и нови методи на изследване, но няма нито едно ръководство за методите на изследване, което да систематизира данните за методите. Именно поради тези причини актуалността на избраната от мен тема е много голяма.
    Цел на работата:
    Систематизирайте данните за състоянието на методите за изследване на ендокринната система в нормални и патологични състояния в съвременния свят.
    Задачи:

      Направете исторически преглед на темата.
      Отразете съвременните познания за методите за изследване на ендокринната система, без подробно описание на изследователските методи и техники.
      Опишете методите за изследване, като използвате примера на една ендокринна жлеза.
      Подчертайте проблемите и перспективите на съвременните методи за изследване на ендокринната система при здраве и болест.
    Курсовата работа се основава на изучаването и анализа на литературни източници, състои се от въведение, две глави, заключение и списък с литература. Общият обем на курсовата работа е 61 листа машинописен текст във формат Microsoft Word 2007, шрифт Times New Roman, 14 пункта, междуредие 1,5. Курсовата работа съдържа 13 фигури, 2 таблици, 32 използвани библиографски заглавия с връзки в текста на работата. Работата е придружена с резюме на руски и английски език.

    1. Преглед на методите за изследване на ендокринната система в нормални и патологични състояния
    1.1. Кратък исторически очерк
    Изследването на ендокринната система и самата ендокринология са сравнително ново явление в историята на науката. Ендокринната система е била недостъпна част от човешкото тяло до началото на 20 век. Преди това изследователите не можеха да разгадаят тайните на ендокринните образувания поради факта, че не можеха да изолират и изследват течностите, които отделят („сокове“ или „тайни“). Учените не са открили никакви „сокове“ или специални отделителни канали, през които обикновено изтича произведената течност. Следователно единственият метод за изследване на функциите на ендокринната жлеза е методът на изрязване на част или на целия орган.
    Учени и историци твърдят, че органите на ендокринната система на Изток са били известни в древни времена и с уважение ги наричат ​​„жлези на съдбата“. Според източните лечители тези жлези са били приемници и трансформатори на космическа енергия, протичаща в невидими канали (чакри) и поддържаща човешката жизненост. Смятало се, че координираната работа на „жлезите на съдбата“ може да бъде нарушена от бедствия, настъпили по заповед на злата съдба.
    Споменаване на заболяване, най-вероятно диабет, се съдържа в египетски папируси от 1500 г. пр.н.е. д.. Гушата и ефектите от кастрацията при животни и хора принадлежат към първите клинични описания на заболявания, чиято ендокринна природа впоследствие е доказана. Стари клинични описания на ендокринни заболявания са направени не само на Запад, но и в древен Китай и Индия.
    Ако във времето организираме значителни открития в много области на ендокринологията, получената картина отразява в миниатюра историята на цялата биология и медицина. След откъслечни клинични наблюдения, направени през античността и средновековието, тези науки напредват изключително бавно. През втората половина на 19 век се наблюдава бърз напредък в много области на медицината, както в качеството на клиничните изследвания, така и в разбирането на механизмите на заболяването. Този процес се дължи на сложността на взаимовръзката на историческите причини.
    Първо, индустриалната революция доведе до натрупване на капитал, който беше използван за развитието на много науки, главно химия и биология.
    Друга революция, настъпила през втората половина на 19 век и имала фундаментално значение за развитието не само на ендокринологията, но и на медицината и биологията, е появата на експерименталното моделиране на животни. Клод Бернар и Оскар Минковски демонстрираха възможността за провеждане на контролирани и възпроизводими експерименти в лабораторни условия. С други думи, създаде се възможност за „кръстосан разпит” на природата. Без работата на тези пионери щяхме да бъдем лишени от голяма част от настоящите ни познания в областта на ендокринологията. Изследването на всички тези вещества, наречени хормони, започва с експерименти върху цели животни (и често предшествани от наблюдения върху болни хора). Тези вещества бяха наречени вещество "X" или фактор "?". Постулатите на Кох за ендокринология предвиждат следния ред на работа:
    1. Отстраняване на съмнителната жлеза.След отстраняването на ендокринната жлеза възниква комплекс от нарушения, дължащи се на загуба на регулаторните ефекти на тези хормони, които се произвеждат в тази жлеза. Поради травматичния характер на операцията, вместо хирургично отстраняване на ендокринната жлеза, може да се използва въвеждането на химикали, които нарушават тяхната хормонална функция. Например, прилагането на алоксан при животни нарушава функцията на β-клетките на панкреаса, което води до развитие на захарен диабет, чиито прояви са почти идентични с нарушенията, наблюдавани след екстирпация на панкреаса. 1
    2. Описание на биологичните ефекти от операцията.Например, предположението за наличието на ендокринни функции в панкреаса е потвърдено в експериментите на И. Меринг и О. Минковски (1889), които показват, че отстраняването му вкучета води до тежка хипергликемия и глюкозурия; животните умират в рамките на 2-3 седмици. след операция на фона на тежък захарен диабет. Впоследствие беше установено, че тези промени възникват поради липса на инсулин, хормон, произвеждан в островния апарат на панкреаса.
    3. Въвеждане на екстракт от жлеза.
    4. Доказателство, че приложението на екстракта премахва симптомите на липса на жлеза.
    5. Изолиране, пречистване и идентифициране на активния компонент.
    По време на Втората световна война се натрупва голямо количество данни в областта на ендокринологията, много от които са от фундаментално значение за последващото развитие на науката. След войната, поради появата на много нови техники, имаше като цяло безпрецедентно ускоряване на темпото на изследванията. И сега, в резултат на рязък приток на технически и творчески сили, броят на публикациите, както по ендокринологията, така и по всички други аспекти на биомедицинските знания, нараства с впечатляваща скорост. Това означава постоянно снабдяване с нови данни, което изисква периодично преразглеждане на стари идеи в тяхната светлина. 2
    20-ти век е белязан от раждането на науката за хормоните или ендокринологията. Самата дума „хормон“ е въведена през 1905 г. от британския физиолог, професор Ернст Старлинг, на лекция в Кралския колеж на лекарите в Лондон. Създаден е от двама професори от университета в Кеймбридж от гръцката дума hormao, което означава „бързо да задвижа“, „да повдигна“ или „да възбудя“. Старлинг го използва, за да опише "химическите носители", освободени в кръвта от ендокринните жлези (ендон - вътрешни + крино - произвеждат), като тестисите, надбъбречните жлези и щитовидната жлеза, както и от външната, екзокринна (екзо - външни) жлези.жлези като слюнчените и слъзните жлези. Тази нова наука се разви много бързо, вълнувайки умовете не само на лекарите, но и на обществото.
    По правило историята на изучаването на всеки хормон преминава през четири етапа.
    Първо се наблюдава въздействието върху организма на отделяния от жлезата секрет.
    Второ, разработват се методи за определяне на вътрешната секреция и степента на нейното влияние върху организма. Това първо се прави чрез биологични тестове, за да се определи ефектът на хормона върху организъм, който има дефицит от него. По-късно са създадени химични методи за такива измервания.
    Трето, хормонът се изолира от жлезата и се изолира.
    И накрая, четвърто, структурата му се определя от химиците и се синтезира. 3
    В наши дни изследователите, които започват с наблюдения на ниво цял организъм, имат все повече въпроси, докато работата им напредва, докато се опитат да разрешат първоначалния проблем на молекулярно ниво. Тук ендокринологичните изследвания са взети в свои ръце от биологичната химия и нейния раздел – молекулярна биология (ендокринология).
    С появата на нови морфологични, химични, електрофизиологични, имунологични и други техники те намират много бързо приложение в ендокринологията. Например през 30-те и 40-те години са използвани много сложни методи за изследване на стероиди. Това доведе до голям напредък в разбирането на структурата и биосинтезата на стероидните хормони. Възможността за използване на радиоактивни изотопи, появила се в края на 40-те - 50-те години, разшири познанията ни за много аспекти на йодния цикъл, междинния метаболизъм, йонния транспорт и др. За изследване на функционалната активност на ендокринната жлеза, нейната способност да улавя от кръвта и натрупват определено съединение. Известно е например, че щитовидната жлеза активно абсорбира йод, който след това се използва за синтеза на тироксин и трийодтиронин. При хиперфункция на щитовидната жлеза се увеличава натрупването на йод, при хипофункция се наблюдава обратен ефект. Интензивността на натрупване на йод може да се определи чрез въвеждане на радиоактивния изотоп 131I в тялото, последвано от оценка на радиоактивността на щитовидната жлеза. Съединения, които се използват за синтеза на ендогенни хормони и са включени в тяхната структура, също могат да бъдат въведени като радиоактивен етикет. Впоследствие е възможно да се определи радиоактивността на различни органи и тъкани и по този начин да се оцени разпределението на хормона в тялото, както и да се намерят целевите му органи.
    По-късно комбинация от електрофореза с поликриламиден гел и авторадиография е използвана творчески за изследване на много протеини, включително хормонални рецептори. Едновременно с този впечатляващ напредък в химията, използването на хистохимични, имунохистохимични и електронномикроскопски методи се оказа още по-плодотворно.
    Всички варианти на хроматография – колонна, тънкослойна, хартиена, многоизмерна, газо-течна (със или без масспектрометрия), високоефективна течна – бяха използвани от ендокринолозите веднага след въвеждането им. Те направиха възможно получаването на важна информация не само за аминокиселинната последователност на пептидите и протеините, но и за липидите (особено простагландините и свързаните с тях вещества), въглехидратите и амините.
    С развитието на молекулярно-биологичните изследователски техники ендокринолозите бързо ги използват за изследване на механизмите на действие на хормоните. В момента методът на рекомбинантната ДНК се използва не само за тази цел, но и за производството на протеинови хормони. Наистина е трудно да се назове биохимичен или физиологичен метод, който да не бъде възприет от ендокринолозите. 4


    1.2. Преглед на съвременните методи за изследване на ендокринната система
    При изследване на пациенти със съмнение за ендокринна патология, в допълнение към събирането на анамнеза за заболяването, преглед и оплаквания на пациента, се използват следните диагностични методи: общи лабораторни методи (клинични и биохимични), хормонални изследвания, инструментални методи, молекулярно-генетични методи.
    В повечето случаи хормонално изследванеима не ключ, а проверяваща стойност за поставяне на диагноза. Хормоналното изследване изобщо не се използва за диагностициране на редица ендокринни заболявания (безвкусен диабет и захарен диабет); в някои случаи хормоналното изследване има диагностична стойност само в комбинация с биохимични показатели (ниво на калций при хипертиреоидизъм).
    Хормоналното изследване може да разкрие намаляване на производството на определен хормон, повишаване и нормалното му ниво (Таблица 1). Най-често използваните методи за определяне на хормоните в клиничната практика са различни модификации радиоимунен метод . Тези методи се основават на факта, че радиомаркираният хормон и хормонът, съдържащ се в тестовия материал, се конкурират помежду си за свързване със специфични антитела: колкото повече даден хормон се съдържа в биологичния материал, толкова по-малко белязани хормонални молекули ще се свържат, тъй като постоянно броят на местата за свързване на хормоните в пробата. Преди повече от 20 години Berson и Yalow предложиха радиоимунен метод за определяне на инсулин.
    Този метод се основава на тяхното наблюдение, че в периферната кръв на пациенти с диабет, лекувани с инсулин, има протеин (по-късно доказано, че е глобулин), който свързва инсулина, белязан с 131I. Значението на тези данни и последващото развитие на радиоимуноанализ за определяне на инсулин се подчертава от присъждането на Нобелова награда на Yalow и Berson.
    Скоро след първоначалните доклади от тези изследователи, съответните методи за определяне на други хормони са разработени и описани от други лаборатории. Тези методи използват или антитела, или серумни протеини, които свързват специфичен хормон или лиганд и носят радиомаркиран хормон, който се конкурира със стандартния хормон или хормон, присъстващ в биологичната проба.

    Принцип радиорецепторен метод по същество не се различава от радиоимуноанализа, само хормонът, вместо да се свързва с антитела, се свързва със специфичен хормонален рецептор на плазмената мембрана или цитозола. Специфични рецептори за повечето полипептидни хормони са разположени на външната повърхност на плазмената мембрана на клетките, докато рецепторите за биологично активни стероиди, както и за тироксин и трийодтиронин, са разположени в цитозола и ядрата. Чувствителността на радиорецепторния анализ е по-ниска от тази на радиоимуноанализа и повечето биологични методи в in vitro системи. За да взаимодейства с рецептора си, хормонът трябва да има подходяща конформация, т.е. да бъде биологично активен. Възможно е даден хормон да загуби способността си да се свързва с рецептора си, но да продължи да взаимодейства с антителата в системата за радиоимунологичен анализ. Това несъответствие отразява факта, че антителата и рецепторите "разпознават" различни части от молекулата на хормона.
    Предложени са редица радиорецепторни методи за хормонален анализ. Обикновено се получава тъкан от органи, специфични за даден хормон, и рецепторите се изолират от нея чрез стандартни техники. Изолираните рецептори на плазмената мембрана в седимента са относително стабилни, когато се съхраняват при температури под -20°C. Въпреки това, разтворените рецептори на полипептиди и стероидни хормони, изолирани от плазмените мембрани или от цитозола и несвързани с лиганди, се оказват нестабилни, което се проявява чрез намаляване на способността им да свързват специфични хормони, дори ако са били съхранявани замразени за относително кратко време.
    Напоследък най-широко разпространени са нерадиоактивните методи. Като стандартен метод за определяне на различни съединения в клиничната химия, имуноанализ , отличаващ се с добра чувствителност, специфичност и широк спектър на приложение. По-специално, имуноанализът се използва за определяне на хормоните. Такива методи включват:

      1) ензимно-свързан имуносорбентен анализ (ELISA), твърдофазен ELISA тип ELISA или хомогенен ELISA тип EMIT.
      2) флуоресцентен имуноанализ (FIA), базиран на измерване на усилване на флуоресценцията, потушаване или поляризация или на изследване на флуоресценция с времева разделителна способност.
      3) био- или хемилуминесцентен имуноанализ.
    Техниката трябва:
    1) да бъдат приложими както за двуместен имунометричен анализ на протеини, така и за директни конкурентни анализи на хаптени, базирани на принципа на свързване.
    2) имат подходяща чувствителност, точност и работен диапазон на определените концентрации с минимално разсейване на резултатите в целия диапазон.
    3) лесен за подобряване за допълнително увеличаване на чувствителността и опростяване на анализа.
    Потенциално техниката трябва да има възможност за нейното усъвършенстване и прилагане при анализи на други вещества, извънлабораторни анализи и анализи без разделяне и за едновременно определяне на няколко вещества (т.нар. множествен имуноанализ). Идеалните методи за имуноанализ са най-близки до луминесцентните или фотоемисионните методи, при които етикетът се открива чрез записване на светлинно излъчване.
    Луминесценцията е излъчване на светлина от вещество в електронно възбудено състояние. Има няколко вида луминесценция, различаващи се само по енергийните източници, които прехвърлят електрони във възбудено състояние, т.е. към по-високо енергийно ниво, а именно:
    1) Радиолуминесценция, при които възбуждането на съответния флуорофор се постига чрез поглъщане на енергията, освободена при процеса на необратим радиоактивен разпад. Възбуденият флуорофор излъчва светлина, връщайки се в основно състояние.
    2) Хемилуминесценция, при които възбуждането се постига в резултат на химическа реакция (обикновено необратима реакция на окисление). Ако химическа реакция се извършва в биологични системи под действието на ензими, тогава в този случай обикновено се използва терминът биолуминесценция. Ако химическата реакция се инициира от повишаване на температурата на реагентите, тогава този тип луминесценция се нарича термохемилуминесценция, но ако реакцията се инициира от електрически потенциал, тогава съответното явление се нарича електрохемилуминесценция.
    3) Фотолуминесценция, при които възбуждането се причинява от фотони на инфрачервена, видима или ултравиолетова светлина. Фотолуминесценцията може допълнително да се подраздели на флуоресценция, при която възбудената молекула бързо се връща в първоначалното си състояние чрез синглетно състояние, и фосфоресценция, при която възбудената молекула се връща в първоначалното си състояние чрез триплетно състояние. Фосфоресцентната емисия се разпада много по-бавно. Излъчваните светлинни кванти имат голяма дължина на вълната. Фотолуминесценцията се различава от радио- и хемилуминесценцията по това, че обикновено е обратима и следователно може да бъде индуцирана многократно в дадена система (тъй като образуването на възбуден междинен продукт и последващото му инактивиране чрез излъчване на светлина не води до химични трансформации).
    В допълнение към тези методи, химичните методи за определяне на редица вещества (обикновено метаболити на хормони и техните прекурсори) не са загубили напълно своето значение. Те често се използват за пречистване на протеинови фракции и изследване на хормони. хроматография . Течната хроматография се използва широко като бърз и селективен аналитичен метод за разделяне и идентифициране на различни вещества. Течната хроматография (LC) в нейния класически вариант (при атмосферно налягане) и високоскоростна или HPLC при повишено налягане е оптималният метод за анализиране на химически и термично нестабилни молекули, високомолекулни вещества с намалена летливост, което се обяснява със специалната роля на на подвижната фаза: за разлика от газообразния елуент в течната химия изпълнява не само транспортна функция. Природата и структурата на компонентите на подвижната фаза контролират хроматографското поведение на отделените вещества. Сред най-типичните обекти на течната хроматография са протеини, нуклеинови киселини, аминокиселини, багрила, полизахариди, експлозиви, лекарства, растителни и животински метаболити. Течната хроматография от своя страна се разделя на течно-адсорбционна (разделянето на съединенията се дължи на тяхната различна способност да се адсорбират и десорбират от повърхността на адсорбента), течност-течност или разпределение (разделянето се извършва поради различна разтворимост в подвижната фаза - елуент и стационарна фаза, физически сорбирана или химически присадена върху повърхността на твърд адсорбент), йонообменна хроматография, където разделянето се постига чрез обратимо взаимодействие на анализираните йонизиращи вещества с йонните групи на сорбента - йон обменник. Специално място в използването на методите на течна хроматография в медицината заемат изключващата по размер или гел хроматографията и афинитетната или биоспецифичната хроматография. Тази версия на LC се основава на принципа за разделяне на смес от вещества според техните молекулни тегла. При ексклюзивната хроматография (от англ. exclusion - изключение; остаряло име - сито) хроматографията молекулите на веществата се разделят по размер поради различната им способност да проникват през порите на сорбента. Подвижната фаза е течност, а неподвижната фаза е същата течност, която е запълнила порите на сорбента (гела). Ако тези пори са недостъпни за молекулите на аналита, тогава съответното съединение ще напусне колоната по-рано от това с по-малки молекулни размери. Молекулите или йоните, чиито размери са между максималния и минималния диаметър на порите на гела, се разделят на отделни зони. Хроматографията с изключване на размера получи особено интензивно развитие през последните две десетилетия, което беше улеснено от въвеждането в химическата и биохимичната практика на Sephadex - декстранови гелове, омрежени с епихлорхидрин. На различни видове Sephadex химикали с различни молекулни тегла могат да бъдат фракционирани, така че те се използват широко за изолиране и пречистване на биополимери, пептиди, олиго- и полизахариди, нуклеинови киселини и дори клетки (лимфоцити, еритроцити), в промишленото производство различни протеинови препарати, по-специално ензими и хормони. 5 Афинитетната хроматография се характеризира с изключително висока селективност, присъща на биологичните взаимодействия. Често една хроматографска процедура може да пречисти желания протеин хиляди пъти. Това оправдава усилието, необходимо за приготвяне на афинитетен сорбент, което не винаги е лесна задача поради риска биологичните молекули да загубят способността си да взаимодействат специфично по време на тяхното ковалентно свързване към матрицата. 6
    При изследване на функционалното състояние на ендокринните жлези се използват следните методологични подходи:
    1. Определяне на първоначалното ниво на определен хормон.
    2. Определяне на нивото на хормона във времето, като се вземе предвид циркадният ритъм на секреция.
    3. Определяне на нивото на хормона при условията на функционален тест.
    4. Определяне на нивото на хормоналния метаболит.

    Таблица 1. Патогенеза на ендокринни заболявания 7

    Най-често в клиничната практика се използва определяне на базалното ниво на определен хормон. Обикновено кръвта се взема на празен стомах сутрин, въпреки че приемът на храна не влияе върху производството на много хормони. За да се оцени активността на много жлези с вътрешна секреция (щитовидна, паращитовидна), оценката на базалното ниво на хормоните е напълно достатъчна. При определяне на базалното ниво на хормона могат да възникнат определени трудности поради циркулацията в кръвта на няколко молекулярни форми на един и същ хормон. На първо място, това се отнася за паратироидния хормон.
    Повечето хормони циркулират в кръвта, свързани с протеини-носители. По правило нивото на свободния, биологично активен хормон в кръвта е десетки или стотици пъти по-ниско от общото ниво на хормона.
    Нивата на повечето хормони имат характерна дневна динамика (денонощен ритъм на секреция), като много често тази динамика придобива клинично значение. Най-важна и показателна в това отношение е динамиката на продукцията на кортизол (фиг. 1.1). 8

    Други примери в това отношение са пролактинът и растежният хормон, чийто ритъм на секреция също се определя от цикъла сън-бодърстване. Патогенезата на редица ендокринни заболявания се основава на нарушаване на циркадния ритъм на производството на хормони.
    В допълнение към циркадния ритъм повечето биологични параметри могат да бъдат отразени в нивото на хормона в кръвта. За много хормони референтните стойности до голяма степен зависят от възрастта (фиг. 1.2) 9, пола и фазата на менструалния цикъл.

    Нивото на редица хормони може да бъде повлияно не само от съпътстващи соматични заболявания и лекарства, приемани за тях, но и от фактори като стрес (кортизол, адреналин), особености на околната среда (нива на тироксин в региони с различна консумация на йод) и състав на храната, приета предния ден (С-пептид) и много други.
    Основният принцип за оценка на активността на зависимите от хипофизата жлези (щитовидна жлеза, надбъбречна кора, гонади) и редица други ендокринни жлези е определянето на така наречените диагностични двойки хормони. В повечето случаи производството на хормони се регулира чрез механизъм на отрицателна обратна връзка. Обратната връзка може да възникне между хормони, принадлежащи към една и съща система (кортизол и ACTH), или между хормони и техния биологичен ефектор (паратироиден хормон и калций). Освен това не е задължително да има пряко взаимодействие между хормоните, съставляващи двойката. Понякога се медиира от други хуморални фактори, електролити и физиологични параметри (обем на бъбречния кръвен поток, ниво на калий и ангиотензин за двойката ренин-алдостерон). Изолираната оценка на показателите, които съставляват една двойка, може да доведе до погрешно заключение.
    Въпреки усъвършенстването на методите за хормонален анализ, функционалните тестове все още имат голяма диагностична стойност при диагностицирането на ендокринопатии. Функционалните тестове се делят на стимулационни и супресивни (потискащи). Общият принцип на изследване е, че стимулационните тестове се предписват при съмнение за недостатъчност на ендокринната жлеза, а супресивните тестове се предписват при съмнение за хиперфункция.
    Наред с оценката на нивото на хормоните в кръвта, в някои случаи определена диагностична стойност може да има определянето на тяхната екскреция в урината. Диагностичната стойност на тези изследвания, например определяне на екскрецията на свободен кортизол, е значително по-малка от тази на съвременните функционални тестове. По същия начин използването на определяне на екскрецията на хормонални метаболити вече е почти напълно преустановено, като единственото изключение е определянето на нивото на катехоламиновите метаболити за диагностициране на феохромоцитом.
    През последните години широко разпространени са напълно автоматизираните методи за хормонално изследване, което намалява броя на грешките като неправилно вземане на кръв, съхранение, доставка и други „човешки фактори“.
    от инструментални методиИзследванията най-често използват ултразвук (УЗИ), радиография, компютърна томография (КТ) и ядрено-магнитен резонанс (ЯМР). Освен това в ендокринологията се използват специални методи: ангиография със селективно вземане на кръв от ендокринната жлеза, радиоизотопно изследване (сцинтиграфия на щитовидната жлеза), костна денситометрия. Основните инструментални методи, използвани за изследване на ендокринните жлези, са представени в таблица 2.
    Молекулярно-генетични методи на изследване.
    Бурното развитие на науката през последните няколко десетилетия и изследванията в областта на молекулярната биология, медицинската генетика, биохимията, биофизиката, тясно преплетени с микробиологията, имунологията, онкологията, епидемиологията и др., доведоха до създаването и активното прилагане на молекулярната биологични диагностични лаборатории методи за изследване на генома на хора, животни, растения, бактерии и вируси. Тези методи най-често се наричат ​​ДНК изследвания.
    Методите за изследване на ДНК позволяват ранна и по-пълна диагностика на различни заболявания, навременна диференциална диагноза и проследяване на ефективността на терапията. Активното развитие на методите за ДНК диагностика и тяхното въвеждане в практиката предполага, че не е далеч моментът, когато тези методи значително ще стеснят обхвата на задачите на по-традиционните диагностични изследвания, като цитогенетичните методи, и може би ще ги изместят от практическата медицина в научната сфера.

    Таблица 2. Основни инструментални методи
    изследване на ендокринни жлези 10

    В момента има две области на ДНК диагностика: хибридизационен анализ на нуклеинови киселини и диагностика с помощта на полимеразна верижна реакция.
    PCR веднага беше въведен в практиката, което направи възможно издигането на медицинската диагностика на качествено ново ниво. Методът стана толкова популярен, че днес е трудно да си представим работа в областта на молекулярната биология без използването му. PCR методът получи особено бързо развитие благодарение на международната програма за човешкия геном. Създадени са съвременни технологии за секвениране (дешифриране на ДНК нуклеотидни последователности). Ако в близкото минало дешифрирането на ДНК от 250 нуклеотидни двойки (bp) отнемаше една седмица, съвременните автоматични секвенсори могат да определят до 5000 bp. на ден. Това от своя страна допринася за значителното нарастване на базите данни, съдържащи информация за нуклеотидните последователности в ДНК. В момента са предложени различни модификации на PCR, описани са десетки различни приложения на метода, включително „long-PCR“, който позволява копиране на ултра-дълги ДНК последователности. За откриването на PCR К. У. Мълис получава Нобелова награда за химия през 1993 г.
    Всички подходи за генна диагностика могат да бъдат разделени на няколко основни групи:
    1. Методи за идентифициране на специфични ДНК участъци.
    2. Методи за определяне на първичната последователност на нуклеотидите в ДНК.
    3. Методи за определяне съдържанието на ДНК и анализ на клетъчния цикъл. единадесет
    PCR ви позволява да намерите в изследвания материал малка част от генетична информация, съдържаща се в специфична последователност от ДНК нуклеотиди на всеки организъм сред огромен брой други ДНК секции и да я умножите многократно. PCR е "in vitro" аналог на биохимичната реакция на синтеза на ДНК в клетката.
    PCR е цикличен процес, във всеки цикъл от който се извършва термична денатурация на двойната верига на целевата ДНК, последващо добавяне на къси олигонуклеотидни праймери и тяхното удължаване с помощта на ДНК полимераза чрез добавяне на нуклеотиди. В резултат на това се натрупват голям брой копия на оригиналната целева ДНК, които лесно се откриват.
    Откриването на PCR доведе до незабавно практическо използване на метода. През 1985 г. е публикувана статия, която описва базирана на PCR тест система за диагностициране на сърповидно-клетъчна анемия. От 1986 г. Към днешна дата повече от 10 000 научни публикации са посветени на PCR. Перспективите за използването на PCR изглеждат повече от впечатляващи. 12
    Цитохимични методи за изследване.
    Тези методи са варианти на описаните in vitro биологични изследвания. Те обикновено имат по-голяма чувствителност от методите за радиоимунологичен анализ, но са много по-тромави и скъпи за определяне. Резултатите от цитохимичните биологични изследвания се оценяват количествено върху хистологични срезове с помощта на специално устройство - микроденситометър.
    Хистологичните срезове се приготвят от хормон-специфични тъкани или целеви клетки, които преди това са били изложени на различни концентрации на стандартния и тестовия хормон. С помощта на денситометър се сканира област с диаметър 250 - 300 nm, за да се определи количествено цветната реакция, причинена от промяна в редокс състоянието на обекта под въздействието на хормонална стимулация. За количествен анализ се използват хистологични багрила, които са чувствителни към тези промени.

    Първата система за цитохимичен биологичен анализ е разработена за ACTH и целевата тъкан в тази система е надбъбречната кора. Други методи за биологично определяне на ACTH са или твърде нечувствителни, или изискват големи обеми плазма. По този начин цитохимичното определяне на редокс състоянието на тъканта е ценно средство за анализиране на нормалната и променена функция на хипоталамо-хипофизно-надбъбречната система въз основа на нивата на ACTH.
    Разработен е цитохимичен метод за определяне на LH, но са възникнали значителни трудности, свързани със значителни флуктуации в резултатите от различни определяния и променливата чувствителност на обекта, което може да отразява известните биологични различия в различните животни. Предложени са чувствителни специфични цитохимични методи за определяне на паратироиден хормон, ADH и тиротропин.

    С по-нататъшно усъвършенстване на оборудването, което ще увеличи броя на изследванията в едно определяне, този метод може да намери по-широко приложение. Той е особено привлекателен, защото не изисква използването на радиоактивни съединения. Цитохимичните методи не се използват широко в клиниката и се използват предимно като чувствителен метод в научните изследвания. 13

    1.3. Съвременни методи за изследване на ендокринната система, използвайки примера за изследване на щитовидната жлеза
    В моята работа, ограничена по обхват, ще разгледам съвременните методи за изследване на ендокринната система в нормални и патологични състояния, като използвам примера за изследване на ендокринната жлеза, което е от значение поради високото разпространение на заболяванията на щитовидната жлеза в Република Башкортостан.
    1. Ултразвуково изследване.
    Ултразвукът ви позволява да проверите доста субективните данни от палпацията. Оптимални за изследване са сензори с честота 7,5 MHz и 10 MHz. В момента се използва цветно доплерово картиране, което позволява визуализация на малките съдове на щитовидната жлеза и дава информация за посоката и средната скорост на потока. Възможностите на метода зависят от опита и квалификацията на специалиста, провеждащ изследването. Принципът на метода е, че ултразвукът, изпращан с чести импулси, прониква в човешките органи, отразява се на границата между среди с различно ултразвуково съпротивление, възприема се от апарата и се възпроизвежда на екрана и ултравиолетовата хартия. Методът е безвреден и няма противопоказания (фиг. 1.3).

    Фиг.1.3. Ултразвук на щитовидна жлеза.
    Комплексни ултразвукови изследвания с използване цветно доплерово картографиране (CDC), (фиг. 1.4). 14

    Ориз. 1.4. AIT с образуване на тиреоидни възли в CD режим.
    2. Тънкоиглена пункционна биопсия на щитовидна жлеза.
    Тънкоиглената биопсия на щитовидната жлеза е единственият предоперативен метод за директна оценка на структурните промени и установяване на цитологичните параметри на образуванията в щитовидната жлеза. Ефективността на получаване на адекватен цитологичен материал по време на биопсия с тънка игла се увеличава значително, ако тази диагностична процедура се извършва под ултразвуков контрол, което позволява да се идентифицират най-променените области на щитовидната жлеза, както и да се избере оптималната посока и дълбочина на пункцията. 15

    3. Цитологично изследване.
    Цитологичната диагностика на образуванията в щитовидната жлеза се основава на набор от определени характеристики, като количеството на получения материал, неговия клетъчен състав, морфологичните характеристики на клетките и техните структурни групи, качеството на цитонамазката и др.
    4. Радиоизотопно изследване (сканиране), сцинтиграфия.
    Радиоизотопното сканиране (сканиране) е метод за получаване на двуизмерно изображение, отразяващо разпределението на радиофармацевтик в различни органи с помощта на скенер.


    Фиг.1.6. Резултат от радиоизотопно сканиране
    щитовидната жлеза

    Сканирането ви позволява да определите размера на щитовидната жлеза, интензивността на натрупване на радиоактивен йод в нея и в отделните й области, което ви позволява да оцените функционалното състояние както на цялата жлеза, така и на фокалните образувания (фиг. 1.6).

    Сцинтиграфия- метод за функционално изобразяване, който се състои във въвеждане в тялоторадиоактивни изотопии получаване на изображение чрез определяне на излъчваноторадиация . На пациента се даварадио индикатор - лекарство, състоящо се от векторна молекула и радиоактивен маркер. Векторната молекула се абсорбира от определена структура на тялото (орган, течност). Радиоактивният маркер служи като „предавател“: той излъчва гама лъчи, които се записват от гама камера. Прилаганото количество радиофармацевтик е такова, че излъчваната от него радиация се улавя лесно, но не оказва токсичен ефект върху организма.
    За сцинтиграфия на щитовидната жлеза най-често използваният технециев изотоп е 99m Tc-пертехнетат. Употребата на 131 йод е ограничена до идентифициране на функциониращи метастази на рак на щитовидната жлеза. За диагностициране на субстернална и аберантна гуша, както и в някои случаи с вроден хипотиреоидизъм (атероза, дистопия, органичен дефект) се използва 123 йод. 16
    5. Определяне на нивата на TSH и тиреоидни хормони.
    Изследване на нивото на TSH и хормоните на щитовидната жлеза (свободен тироксин и трийодтиронин) е показано за всички със съмнение за патология на щитовидната жлеза. Понастоящем е по-целесъобразно да се изследват свободните фракции на тиреоидните хормони в комбинация с определяне на нивото на TSH.
    6. Определяне на нивото на тиреоглобулин в кръвта.
    Повишеното съдържание на тиреоглобулин в кръвта е характерно за много заболявания на щитовидната жлеза, открива се в рамките на 2-3 седмици след пункционна биопсия, както и в рамките на 1-2 месеца след операция на щитовидната жлеза.
    7. Определяне на нивото на калцитонин в кръвта.
    При пациенти с фамилна анамнеза за медуларен рак на щитовидната жлеза (синдром на множествена ендокринна неоплазия тип 2 и 3) трябва да се определи нивото на калцитонин в кръвта. Във всички останали случаи определянето на калцитонин не е показано.
    Нормалното ниво на калцитонин в кръвта не надвишава 10 pg / ml , Нивото на този маркер, над 200 pg / ml, е най-важният диагностичен критерий за медуларен рак на щитовидната жлеза.

    8. Тест за функцията на щитовидната жлеза.
    Тестовете за функцията на щитовидната жлеза са кръвни изследвания, използвани за оценка на ефективността на работата на щитовидната жлеза. Тези тестове включват тест за тироид стимулиращ хормон (TSH), тест за тироксин (Т4), тест за трийодтиронин (Т3), тест за тироксин свързващ глобулин (TBG), тест за трийодтиронин катран (T3RU) и дългосрочен тест за стимулиране на щитовидната жлеза (LATS). ) .
    Функционалните тестове на щитовидната жлеза се използват за:

      помощ при диагностициране на недостатъчна функция на щитовидната жлеза (хипотиреоидизъм) и свръхактивност на щитовидната жлеза (хипертиреоидизъм)
      оценка на активността на щитовидната жлеза
      проследяване на отговора на лечението с щитовидната жлеза
    Повечето смятат за чувствителни тест за тироид стимулиращ хормон (TSH).най-точният показател за активността на щитовидната жлеза. Чрез измерване на нивата на TSH лекарите могат да открият дори незначителни проблеми с щитовидната жлеза. Тъй като този тест е много чувствителен, аномалиите във функцията на щитовидната жлеза могат да бъдат открити преди пациентът да започне да се оплаква от симптоми.
    TSH казва на щитовидната жлеза да освободи хормоните тироксин (Т4) и трийодтиронин (Т3). Преди да се използват тестовете за TSH, са използвани стандартни кръвни тестове, измерващи нивата на Т4 и Т3, за да се определи дали щитовидната жлеза работи правилно. Тестът за трийодтиронин (Т3) измерва количеството на този хормон в кръвта. Т3 обикновено присъства в много малки количества, но има значителен ефект върху метаболизма. Той е активен компонент на хормоните на щитовидната жлеза.

    Тест за тироксин-свързващ глобулин (TBG).тества кръвните нива на това вещество, което се произвежда в черния дроб. GTD се свързва с Т3 и Т4, предотвратявайки изхвърлянето на хормоните от кръвта от бъбреците и освобождаването им, когато и където са необходими за регулиране на функциите на тялото.
    Тест за усвояване на трийодтиронин катран (T3RU)измерва нивата на Т4 в кръвта. Лабораторният анализ на този тест отнема няколко дни и се използва по-рядко от тестовете, чиито резултати са достъпни по-бързо.
    Тест за дългодействащ тиреоиден стимулатор (LATS)показва дали кръвта съдържа дългодействащ тиреоиден стимулант. Ако присъства необичайно в кръвта, LATS кара щитовидната жлеза да произвежда и освобождава необичайно големи количества хормони.
    9. Компютърна, магнитно-резонансна томография, трансмисионна оптична томография.


    CT и MRI са високоинформативни неинвазивни методи, които визуализират щитовидната жлеза. Понастоящем обаче тези изследвания се извършват доста рядко поради високата цена и ниската наличност на подходящо оборудване. Наред с оценката на локализацията на щитовидната жлеза, нейните контури, форма, размер, структура, връзка със съседните тъкани, размер и структура на регионалните лимфни възли, КТ позволява да се определи денситометричната плътност на образуванията в щитовидната жлеза. И CT, и MRI са методите на избор при диагностициране на субстернална гуша. Компютърната томография (КТ) е рентгенов метод за изследване, основан на неравномерното поглъщане на рентгеново лъчение от различни тъкани на тялото, използван главно при диагностицирането на патология на щитовидната жлеза, коремната област (черен дроб, жлъчен мехур, панкреас, бъбреци, надбъбречни жлези и др.)
    Компютърната томография ви позволява да получите информация за конфигурацията, размера, местоположението и степента на всяка формация, тъй като този метод разграничава твърдите и меките тъкани по плътност.
    Магнитно-резонансната томография (ЯМР) е инструментален диагностичен метод, използван в ендокринологията за оценка на състоянието на хипоталамо-хипофизо-надбъбречната система, скелета, коремните и тазовите органи.

    ЯМР ви позволява да получите информация за конфигурацията на костите, размера, местоположението и степента на всяка формация, тъй като този метод разграничава твърдите и меките тъкани по плътност.
    ЯМР през последните години става все по-важен при диагностицирането на патологията на хипоталамо-хипофизната област и се превръща в метод на избор при изследване на пациенти със съмнение за лезии в тази конкретна област (фиг. 1.7).


    Фиг.1.7. Подготовка за ЯМР.
    По време на ядрено-магнитен резонанс подвижна маса с пациента се движи през „тунел“, който генерира електромагнитно поле, което от своя страна създава радиация, която позволява да се получи триизмерно изображение на вътрешната структура на тялото.

    Заболявания, диагностицирани с ЯМР:

      ? тумори на хипофизата (напрпролактинома , болест на Иценко-Кушинг)
      ? надбъбречни образувания (напр. синдром на Кушинг, алдостерома, феохромоцитом)
      ? остеопороза
      ? и т.н.
    Предимства на ЯМР:
      ? ви позволява да получите секции с дебелина 2-3 mm във всяка равнина
      ? способността да се прецени по естеството на сигнала не само наличието на образувание, но и неговата вътрешна структура (кръвоизливи, кисти и др.)
      ? липса на излагане на йонизиращо лъчение върху пациента и почти пълна безвредност, което е важно при изследване на деца, както и, ако е необходимо, многократни повторни изследвания.
    Още по-модерен метод за томография, но все още не широко въведен в практиката, е трансмисионната оптична томография (ТОТ), която използва нискомощно (от порядъка на десетки mW) лъчение в близкия инфрачервен диапазон, което е практически безвредно за хората (фиг. 1.8.). Потенциалните ползи от TOT надхвърлят неговата безопасност. Използването на инфрачервено лъчение, което се абсорбира добре от хемоглобина в окси- и дезокси-състояния (при различни дължини на вълната), позволява да се получи пространствено разпределение на степента на оксигенация на тъканите, което е невъзможно при други техники. Използването на радиация със специфични дължини на вълните също така ще направи възможно определянето на пространственото разпределение на NAD, NAD + (NADH), триптофан, различни цитохроми (билирубин, меланин, цитохромоксидаза) и концентрацията на вода. Всичко това позволява не само успешно и навременно диагностициране на редица заболявания (дисплазия, тумори, тромбози, хематоми), но и получаване на информация за метаболитните процеси и функционирането на различни органи във времето. По-специално, оптичната томография ще даде възможност да се наблюдава в реално време пространственото разпределение на наситеността на тъканите с вода и pH фактора. 17

    Ориз. 1.8. Системата CTLM е един от първите в света серийни оптични томографи.
    10. Имунохистохимично изследване на тиреоидна туморна тъкан.
    Те се извършват в тъканта на тумори на щитовидната жлеза, получени в резултат на операция. Основната цел на това изследване е прогностична. В тъканта на щитовидната жлеза се определя наличието на вещества като p53 (ген за потискане на туморния растеж), CD44, Met (протеогликани, отговорни за метастазите), PTC, ras-онкогени (онкогени, регулиращи прогресията на тумора) и други. Най-важното в клиничната практика е откриването на имунореактивност p53, Metи PTC в тъканта на рак на щитовидната жлеза. Наличието на тези маркери в туморната тъкан е признак за бързо (в рамките на 2-5 месеца) развитие на метастатично заболяване при оперирания пациент. Изследването е скъпо и изисква специално лабораторно оборудване. Понастоящем определянето на туморни маркери се извършва главно в специализирани онкологични клиники за определени показания, а именно, ако пациентът има други прогностични признаци на рецидив на тумора или развитие на метастатично заболяване (слабо диференциран рак на щитовидната жлеза, възраст на пациента над 55 години, инвазия на околните тъкани от тумора и др.). 18
    11. Имунологични методи.
    Имунологичните методи включват предимно ензимно-свързан имуносорбентен анализ (ELISA). ELISA е метод за откриване на антигени или антитела, базиран на определянето на комплекса антиген-антитяло поради:

      предварително фиксиране на антигена или антитялото върху субстрата;
      добавяне на тестовата проба и свързване на фиксирания антиген или антитяло към целевия антиген или целевото антитяло;
      последващо добавяне на антиген или антитяло, белязани с ензимен етикет с откриването му с помощта на подходящ субстрат, който променя цвета си под действието на ензима. Промяната в цвета на реакционната смес показва наличието на целева молекула в пробата.Определянето на продуктите на ензимните реакции при изследване на тестови проби се извършва в сравнение с контролните проби.
    Преди появата на методите ELISA диагнозата на заболяванията на щитовидната жлеза се основаваше на анализа на клиничната картина, която не винаги ясно отразява развитието на патологията и се проявява в доста късни етапи. Днес ELISA методите са основните за идентифициране на нарушения във функцията на щитовидната жлеза, диференциална диагноза и проследяване на лечението. 19
    Изследване на нивата на антитироидни антитела – имунохемилуминесцентен метод. Изследвано е разпространението на антитела срещу антигени на щитовидната тъкан: тиреоглобулин, тиреоидна пероксидаза и TSH рецептор при пациенти с дифузна токсична гуша и ендокринна офталмопатия. При изследване такива пациенти имат високо ниво на антитела срещу TSH рецептора, което намалява с тиреостатична терапия. 20 Доказано е, че определянето на антитела срещу TSH рецептора и тиреоглобулина трябва да служи като допълнителен диагностичен критерий по време на изследването. 21
    Методи за определяне на антитела срещу TSH рецептора:
    1. Дефиниция на TBII
    1.1. Радиорецепторен метод
    1.1.1. Използване на свински rTSH (TRAK)
    1.1.2. Използване на човешки rTSH, експресиран от СНО клетки (CHO-R)
    1.1.3. Използване на rTSH, експресиран в левкемични клетки (K562)
    1.2. FACS
    1.3. Имунопреципитация
    2. Биологични методи за определяне на стимулиращи (TSAb) и блокиращи (TBAb) антитела
    2.1. Оценка на производството на cAMP (определено чрез RIA)
    2.1.1. в FRTL-5 клетки
    и т.н.................

    8. Функционални и диагностични методи за изследване на заболявания на ендокринната система.ppt

    • Брой слайдове: 29

    За по-лесно разбиране на тази лекция, нека си припомним някои кратки анатомо-физиологични данни за ендокринната система. n Ендокринната система е системата, която отделя хормони в кръвта. „Хормоните“ са химически вещества, секретирани в кръвоносните или лимфните съдове и оказващи различни ефекти върху целевите органи. n Още в средата на ХХ век тя включва главно ясно организирани морфологични образувания, наречени жлези. n n. Досега тази концепция е станала много по-широка. Оказа се, че много други органи и тъкани имат ендокринни функции.

    n Например, едно от тези места се оказа хипоталамуса. n Оказа се, че хипоталамусът секретира: тиреолиберин, люлиберин, кортиколиберин, пролактолиберин, фоликулолиберин, соматолиберин, меланоцитолиберин, лутеостатин, меланоцитостатин, които регулират функционирането на хипофизната жлеза.

    n Черният дроб секретира ангиотензин. Бъбреци – еритропотин и ренин. Стомах – гастрин, соматостатин. n 12 дуоденално и тънко черво - мотилин, секретин, холецистокинин, панкреозимин, соматостатин. Сърдечни предсърдия и мозък - съответно предсърдни и мозъчни натриеви пептиди. Съединителната тъкан и клетките от мезенхимен произход са соматомедини. n Мастна тъкан – лептин, адипонектин и др.

    н. В нашата тема не е възможно да анализираме подробно всички тези хормони и техните действия. Но тази информация трябва да се запомни веднъж завинаги: ендокринната система не е само жлезите с вътрешна секреция. Въпреки това тук и днес сме принудени да говорим конкретно за жлезите с вътрешна секреция и техните функции.

    n Системата от ендокринни жлези е разпръсната из цялото тяло (фиг.) 1. Хипофизна жлеза. 2. Щитовидна жлеза. 3; 4 и 7. Надбъбречни жлези. 5. Полови жлези. 6. Панкреас. 8. Тимус (тимусна жлеза) 9. Паращитовидни жлези. 10. Епифиза. Нека разгледаме накратко тяхната морфология и функции.

    н. Епифизната жлеза отделя хормона мелатонин, който активира деленето на пигментните клетки в кожата и има антигонадотропно действие. н. Хипофизната жлеза се състои от предна аденохипофиза и задна - неврохипофиза и междинни части (лобове). Предният дял на хипофизната жлеза произвежда соматотропин - хормон на растежа; гонадотропни хормони, които стимулират мъжките и женските репродуктивни жлези; лактогенен хормон, който подпомага секрецията на естроген и прогестерон от яйчниците; ACTH, който стимулира производството на надбъбречни хормони; TSH, който регулира функционирането на щитовидната жлеза Задният дял на хипофизната жлеза съдържа два хормона: окситоцин, който регулира раждането и секрецията на млечните жлези, и вазопресин или антидиуретичен хормон, който основно регулира реабсорбцията на вода от бъбреците тубули , Междинната част е хормонът интермедин, който регулира метаболизма на пигмента в покривните тъкани.

    ЩИТОВИДНАТА ЖЛЕЗА произвежда тироксин (Т 4) и трийодтиронин (Т 3), които регулират общия метаболизъм в организма, влияят върху формирането на скелета, ускоряват растежа на костите и осификацията на епифизния хрущял; калцитонин, който регулира метаболизма на калций и фосфор. Неговите функции се изследват чрез определяне на тези хормони.

    Паращитовидните жлези регулират метаболизма на калций и фосфор. Отстраняването на паращитовидните жлези причинява гърчове и може да доведе до смърт. n Тимус (тимусната жлеза е най-важният орган на имунологичната защита на тялото. Осигурява диференциацията и пролиферацията на стволови клетки от костен мозък; произвежда ензима тимозин, който осигурява имунологичната компетентност на лимфоцитите в цялото тяло. Т лимфоцитите се образуват в костният мозък навлиза в тимуса и под въздействието на тимозина става диференциран, имунологично компетентен и става основен медиатор на клетъчния имунитет n n

    n Надбъбречните жлези се състоят от два слоя - кора и медула n Медулата произвежда два хормона, които медиират симпатиковата нервна система - адреналин и норепинефрин. Те повишават контрактилитета и възбудимостта на сърцето, свиват кръвоносните съдове на кожата и повишават кръвното налягане. . n Кората на главния мозък е изключително важно образувание на човешкото тяло. Той произвежда около 30 различни хормона, които регулират концентрацията на натрий, калий и хлор в кръвта и тъканите, метаболизма на въглехидратите, протеините и мазнините, както и производството на полови хормони.

    Панкреасът е орган, който има както екзокринни, така и ендокринни функции. Екзокринната функция беше разгледана в раздела за заболявания на храносмилателната система. Ендокринната функция се осигурява от специални клетки, събрани в малки острови (островчета на Лангерханс), които са вградени в тъканта на жлезата по целия й обем. Те произвеждат хормона инсулин. Инсулинът основно регулира въглехидратния метаболизъм - консумацията на глюкоза от различни системи на тялото, осигурявайки преноса

    Нека сега разгледаме въпросите за нормата на хормоните, секретирани от тези жлези.Тук, за съжаление, трябва незабавно да направим уговорка, че в различни източници в Русия можете да намерите значително различни нормални стойности на тези хормони, което зависи от липсата на стандартизацията на изследователските методи и на хаоса, който съществува днес в тази страна. Дори и да има единни стандарти в Русия, никой няма да се придържа към тях - всеки използва метода, който му е по-лесен за изпълнение или който му харесва най-много. Ние обаче трябва да ви посочим приблизителни стандарти и вие трябва да ги знаете. n Както бе споменато по-горе, предният дял на хипофизната жлеза секретира значително количество от голямо разнообразие от хормони.

    Нивото на GH на гладно е 8 ng/ml. Както е известно, свръхпроизводството на този хормон може да се наблюдава при гигантизъм или акромегалия, а недостатъчното производство може да се наблюдава при хипофизен нанизъм, който обсъдихме в лекцията „Въпрос, преглед... за ендокринни заболявания“ n TSH е 0,45 - 6,2 микрона. IU/ml. Тироид-стимулиращият хормон регулира функцията на щитовидната жлеза и свръхпроизводството му може да доведе до хипертиреоидизъм, а намаленото производство може да доведе до микседем.

    ACTH – (на гладно, в 8 часа сутринта, в легнало положение) -

    Заблудата ме води навсякъде - глупостите на вестниците, телевизията, радиото. Безсмислен обстрел: полетът е твърде кратък, но винаги удря и ранява. Невъзможно е да прекъснеш тази глупост, Не можеш да се предпазиш от нея с тапи за уши... Тези, които създават проблеми от победи, И търгуват с изгубени души, И други, за да блокират вика, За да се чуят най-накрая, Покажете истерична ловкост Дори в църквата в молитви към Всевишния.

    n Нивото на PL при мъжете е 2–12 ng/ml, при жените 2–20 ng/ml. n Нивото на ADH в кръвта е 29 ng/ml. n Прицелната рентгенография на “sella turcica” и особено изследванията с ядрено-магнитен резонанс (ЯМР) и компютърната томография са от голяма полза при диагностицирането на заболявания на хипофизната жлеза. n Тези методи позволяват откриването на тумори на хипофизата до 0,2 cm в диаметър (микроаденоми) с 97% сигурност.

    Панкреас Основните методи за изследване на ендокринната функция на панкреаса са директното определяне на нивото на инсулин и глюкагон в кръвта. Тези методи обаче все още не са навлезли в масовата практика. Най-широко използваните методи за индиректно изследване на инсулинопродуциращата функция на панкреаса са определяне на глюкоза в кръвта и урината и тест за глюкозен толеранс.

    n Определянето на глюкозата в кръвта се извършва на празен стомах. Нормалното ниво варира от 3,33 до 5,5 (според някои методики до 6,105) mmol/l. n Повишаването на нивата на кръвната захар се нарича n Този показател е почти хипергликемия. надежден признак за наличието на захарен диабет при човек (трябва да се помни, че хипергликемията може да има и друг произход). n Може да има и понижение на нивата на кръвната захар, което се нарича хипогликемия. Това състояние може да възникне както при захарен диабет, така и при редица заболявания, които могат да се основават на тумори или увреждане на жлезите с вътрешна секреция от друг ред.

    n Определянето на глюкоза (захар) в урината обикновено се извършва в дневен обем урина. Обикновено в урината няма глюкоза. Появата му се нарича глюкозурия и е сериозен признак на захарен диабет, въпреки че понякога може да се появи след обилна консумация на сладки храни и рядко заболяване - бъбречен диабет. n Тест за глюкозен толеранс. При много хора диабетът протича скрито, латентно (т.нар. нарушен глюкозен толеранс). Тези хора може да имат леки стигми на диабет, които не се потвърждават от рутинни изследвания на урина и кръв. За изясняване на диагнозата в тези случаи е разработен този тест.

    Обикновено тестът се извършва по следния начин: на субекта се взема кръв за изследване на глюкоза на празен стомах, след което се дават 75 g (или по-точно 50 g на m 2 телесна площ) глюкоза, разтворена в 100-200 ml от вода за пиене и кръвта се изследва за глюкоза на всеки 30 минути през следващите 3 часа n Тълкуване на резултатите: при здрав човек повишаването на нивата на глюкозата след 1 час не надвишава 80% от първоначалното ниво, до 2 часа спада до нормалното и до 2,5 часа може да падне под нормата. n При пациентите максималното покачване се наблюдава след 1 час, достига цифри над 80% от първоначалната стойност и нормализирането се забавя с 3 часа или повече. н

    n n Щитовидна жлеза Методите за изследване на функциите и клиничната морфология на щитовидната жлеза включват определяне на протеиново свързан йод, нивото на тиреоидните хормони, формата и размера на жлезата. Определянето на протеин-свързан йод (PBI) е един от най-важните и точни методи за изследване на функцията на жлезата. SBI се състои от 90-95% от тиреоидния хормон тироксин. Нормално SBI е 315, 18,630, 37 nmol/l. При тиреотоксикоза нивото му е над 630,37 nmol/l, при хипотиреоидизъм е по-малко от 315,18 nmol/l.

    n Тироксин (Т 4) и трийодтиронин (Т 3) се определят от тиреоидните хормони. Приблизителни норми: T 4 60 160 nmol / l и T 3 1, 2 2, 8 nmol / l. В същото време, като правило, се определя нивото на TSH, което според същите методи обикновено е 0,17 4,05 nmol / l. n Един от обективните методи за изследване на морфологията и функцията на щитовидната жлеза е сканирането с радиоактивни изотопи. Скенограмите могат да очертаят размера на щитовидната жлеза, областите на хипо- и хиперфункция. n n

    н. През последните години ултразвуковото изследване (ултразвук) се използва широко за изследване на щитовидната жлеза. Ехографията в момента е метод на избор за определяне на размера на щитовидната жлеза и наличието на промени в нейната структура. n Високоефективен метод за изследване е КТ, който ви позволява да изследвате размера и структурата, да идентифицирате тумори или други промени в него.

    Надбъбречни жлези (кортикален слой) За да се изследва функцията на надбъбречната кора, алдостеронът се определя в урината, 17 хидроксикортикостероиди (17 OX) в кръвта и урината и 17 неутрални кетостероиди (17 KS) в урината. n Определяне на алдостерон. Смята се, че има правопропорционална връзка между количеството алдостерон в урината и минералокортикоидната активност на надбъбречната кора. n Здравите хора отделят от 8,34 до 41,7 nmol/ден. алдостерон. n Повишена екскреция на алдостерон в урината може да се наблюдава при така наречения първичен и вторичен хипералдостеронизъм (аденом или тумор или кортикална хиперфункция). н

    Определение 17 OCS отразява нивото на глюкокортикостероидите в кръвта. n Обикновено 17 OCS в кръвта съдържа от 0,14 до 0,55 µmol/l. n Постоянно повишаване на нивата на 17-ox се наблюдава при надбъбречни тумори и синдром на Кушинг. n Намаляване на 17 OCS се установява при хипофункция на надбъбречната кора или недостатъчност на предния дял на хипофизната жлеза. n n Екскрецията на 17-OX в урината обикновено съответства на промените в кръвта. Определянето на кортизол в урината се счита за още по-специфично за изследване на глюкокортикостероидната функция на надбъбречните жлези. n Нормално 55 248 nmol/ден. н

    n Определение 17 CC. Повечето от 17 CS идват от андрогени, така че тяхното определяне ни позволява да направим преценка за андрогенната функция на надбъбречната кора. Нормално 27,7 79,7 µmol/ден се екскретират при мъжете и 17,4 55,4 при жените. n Намаляване на освобождаването на 17 KS е типично за надбъбречна недостатъчност, повишение за тумори. n Съществуват и методи за индиректно определяне на функциите на надбъбречната кора. Те включват определяне на натрий и калий в кръвта и урината. н

    Известно е, че в регулирането на нивата на електролитите (особено натрий и калий) основната роля принадлежи на минералокортикоидите, по-специално на алдостерона, и в по-малка степен на глюкокортикоидите. n В тази връзка нивото на натрий и калий в кръвта и тяхната екскреция в урината косвено ще покаже състоянието на производството на тези хормони от надбъбречните жлези. Нормално натрият в кръвната плазма съдържа 135-145 mmol/l, а калият 3,8-4,6 mmol/l. n Нормално 122 260 mmol/ден се екскретират в урината. натрий и 25 100 mmol/ден. калий n На практика рядко се извършва определяне в урината. н

    Надбъбречни жлези (медула) До изследване на функцията на надбъбречната медула най-често се прибягва при съмнение за тумор. Изследват се 3 хормона - адреналин, норепинефрин, допамин в кръвта или плазмата. n Нивото им в плазмата е равно на - адреналин