Ретикулоцити (reticulocytus). Ретикулоцити (клинично значение и лабораторна диагностика) Как да броим ретикулоцитите

Преброяване на ретикулоцитите в намазка след оцветяването им със специални багрила

Принцип на метода: Откриване на грануларно-ретикуларното вещество на ретикулоцитите по време на суправитално оцветяване с алкални бои с последващо преброяване в кръвна натривка.

Можете да използвате едно от следните бои: Azur разтвор I;Azur разтвор II;

Процедура за определяне: Оцветяването се извършва върху стъкло или в епруветка.

Оцветяване на ретикулоцити в епруветка с Azure II

В епруветка се поставят 0,05 ml разтвор на боя Azure II и 0,2 ml кръв. Сместа се разбърква старателно и се оставя за 20 - 30 минути. Разбъркайте отново и пригответе тънки намазки.

Оцветяване на ретикулоцити в епруветка с Azure I

Поставете 0,3–0,5 ml разтвор на азур I и 5–6 капки кръв в епруветка с помощта на пипета от апарата на Панченков. Епруветката се затваря с гумена запушалка, сместа се разбърква старателно, но внимателно и се оставя за 1 - 1,5 часа (ретикулоцитите се оцветяват по-добре при експозиция от 1,5 - 3 часа). Разбъркайте и пригответе тънки намазки.

Приготвените натривки се изследват под микроскоп с имерсионна леща. В намазката ретикулоцитите и еритроцитите са оцветени в жълтеникаво-зеленикаво, гранулираната нишковидна субстанция в ретикулоцитите е синя (когато е оцветена с лазурно II) или синкаво-виолетово (когато е оцветена с лазурно I).

Ретикулоцитите са важен показател за регенеративната способност на костния мозък. Увеличаването им в периферната кръв (ретикулоцитоза) се наблюдава при хемолитична анемия, при хемолитични кризи, при остра кръвозагуба, малария, при лечение на желязодефицитна анемия с желязо, при остър кислороден дефицит. Наличието на повишен брой ретикулоцити позволява да се подозира скрито кървене (например при пациенти с коремен тиф, пептична язва).

Намаляване на броя или липсата на ретикулоцити (ретикулоцитопения) се наблюдава при арегенеративна апластична и хипопластична анемия; анемия, причинена от недостиг на желязо, витамин В12, фолиева киселина; с ракови метастази в костите; лъчева болест; лъчетерапия; лечение с цитостатици.

Техника за провеждане на теста на Ривалта.

Тестът на Ривалта е биохимичен тест за разграничаване на трансудат и ексудат.

Техниката е следната: ексудатите съдържат серомуцин (съединение от глобулинова природа), което дава положителен тест (денатурация) със слаб разтвор на оцетна киселина. В цилиндъра се наливат 100-150 ml дестилирана вода, подкислява се с 2-3 капки ледена оцетна киселина и капка по капка се добавя изследваната течност. Падаща капка ексудат образува облак под формата на бял облак, който се спуска към дъното на съда. Капка трансудат не образува мътност или е незначителна и бързо се разтваря. Въпреки тези разлики между ексудати и трансудати, не винаги е лесно да ги разграничите на практика, тъй като понякога трябва да се справите с редица преходни течности, както и ексудати, които са близки до трансудатите по съдържание на протеин и относителна плътност.

Отзивите, публикувани на този сайт, са лични мнения на хората, които са ги написали. Не се самолекувайте!

Ретикулоцити (клинично значение и лабораторна диагностика)

(1) ретикулоцити, които имат ядро (еритронормобласти) и тяхната грануларност е разположена под формата на плътен ръб около ядрото;

(2) ретикулоцити, имащи гранулирана мрежеста субстанция под формата на топка или бучка;

(3) ретикулоцити, гранулирани под формата на гъста мрежа;

(4) ретикулоцити, имащи гранулирана мрежеста субстанция под формата на отделни нишки;

(5) ретикулоцити, съдържащи отделни гранули.

При хемолитична анемия (броят на ретикулоцитите може да достигне 60% или повече (увеличава се особено силно по време на хемолитични кризи);

В случай на остра загуба на кръв (ретикулоцитна криза настъпва 3-5 дни след загубата на кръв), включително увеличаване на ретикулоцитите, може да се подозира скрито кървене (например при пациенти с пептична язва на стомашно-чревния тракт, коремен тиф);

При лечение на желязодефицитна анемия с желязо (няколко дни (3-10) след началото на антианемичното лечение на пернициозна анемия);

При остър недостиг на кислород;

С туморни метастази в костния мозък.

Анормална форма на хемоглобина;

За арегенеративна апластична и хипопластична анемия;

При анемия, причинена от недостиг на желязо, витамин В12, фолиева киселина (микроцитарно-хипохромна и мегалобластна анемия);

Със сидеробластна анемия;

С ракови метастази в костите;

При лъчева болест и лъчетерапия;

При лечение с цитостатици;

При автоимунни заболявания на хемопоетичната система;

При бъбречни заболявания;

С рецидив на анемия на Addison-Biermer;

Неправилен избор на антикоагулант или недостатъчно смесване на кръвта с антикоагуланта;

Продължително стискане на ръката с турникет;

Прием на сулфонамиди (възможни са както подценени, така и надценени резултати);

Кръвопреливане малко преди изследването;

Хемолиза на кръвна проба.

Оценка на активността на еритропоезата при състояния, придружени от хемолиза или кръвозагуба;

Оценка на способността на костния мозък за регенерация след цитотоксична терапия и трансплантация на костен мозък;

Оценка на възстановяването на синтеза на еритропоетин след бъбречна трансплантация;

Допинг контрол при спортисти (прием на еритропоетин);

Диагностика на неефективна хемопоеза или намалено производство на червени кръвни клетки;

Диференциална диагноза на анемия;

Откриване на нарушена регенеративна способност на костния мозък поради дефицит на желязо, витамини B12, B6, фолат, мед и проследяване на подходяща терапия;

Оценка на отговора към терапия с еритропоетин и еритросупресори.

Ретикулоцити с ниско съдържание на РНК, най-зрелите (LFR%, ретикулоцитни фракции с ниска флуоресценция);

Ретикулоцити със средно съдържание на РНК (MFR%, ретикулоцитни фракции със средна флуоресценция) - фракция на ретикулоцити със средна флуоресценция);

Ретикулоцити с високо съдържание на РНК (HFR%, ретикулоцитни фракции с висока флуоресценция) - фракция от ретикулоцити с висока флуоресценция);

Фракция на незрели ретикулоцити (IRF%, фракция на незрели ретикулоцити).

Преброяване на ретикулоцитите в намазка след оцветяването им със специални багрила

Преброяването на ретикулоцитите в цитонамазка след оцветяването им със специални багрила на практика е най-използваният метод за преброяване на броя на ретикулоцитите. Това се дължи на факта, че методът е прост, доста евтин и не изисква специално скъпо оборудване, поради което може да се използва във всяка клинична диагностична лаборатория.

Принцип на метода

Откриване на грануларно-ретикуларното вещество на ретикулоцитите по време на суправитално оцветяване с алкални бои с по-нататъшното им преброяване в кръвна натривка.

Реактиви

Можете да използвате една от следните бои:

Наситен разтвор на брилянтно крезил синьо в абсолютен алкохол (за да приготвите абсолютен алкохол, трябва да накиснете 96% етанол в няколко промени калциниран меден сулфат на прах). За 100 ml абсолютен алкохол вземете 1,2 g боя.
Разтвор на лазур I: лазур I – 1 g, амониев оксалат – 0,4 g, натриев хлорид – 0,8 g, етилов алкохол 96% – 10 ml, дестилирана вода – 90 ml. Разтворът на боята в затворена бутилка се поставя в термостат при 37°С за 2-3 дни и периодично се разклаща енергично. След това се охлажда до стайна температура и се филтрира през хартиен филтър. Разтворът се съхранява в тъмен стъклен съд. Ако се появи утайка, боята трябва да се филтрира отново.
Azur II разтвор: Azur II – 1 g, натриев цитрат – 5 g, натриев хлорид – 0,4 g, дестилирана вода – 45 ml. Разтворът се оставя в термостат при 37°С в продължение на 2 дни, като се разбърква от време на време. За да се ускори разтварянето, боята може да се загрее на слаб огън за 15 - 20 минути, без да се довежда до кипене. Охлажда се до стайна температура и се филтрира. Съхранявайте в тъмни стъклени съдове.

Специално оборудване

Напредък на решимостта

Оцветяването на ретикулоцити се извършва върху стъкло или в епруветка.

Оцветяване на ретикулоцити върху стъкло

При оцветяване на ретикулоцити върху стъкло, добре измито и обезмаслено предметно стъкло се нагрява върху пламък на горелка. С помощта на стъклена пръчица нанесете капка от едно от изброените по-горе бои върху стъклото и пригответе намазка от боя с помощта на смляно стъкло. Използва се стъклограф за маркиране на страната на стъклото, върху която се нанася петно от боя. В тази форма стъклото може да се подготви за бъдеща употреба и да се съхранява на сухо и тъмно място. Преди анализ подгответе мокра камера. Обикновено за това се използва петриево блюдо с ролки от навлажнена памучна вата или филтърна хартия, поставени около краищата. Нанесете капка кръв върху петно от боя, пригответе тънко петно от него и веднага го поставете във влажна камера за 3 до 10 минути. След това намазките се изсушават на въздух.

Оцветяване на ретикулоцити in vitro

Оцветяването на ретикулоцитите в епруветка се различава, когато се използват различни багрила.

Метод 1 – оцветяване на ретикулоцити в епруветка с брилянтно крезил синьо.

Преди употреба пригответе работен разтвор на брилянтно крезил синьо в епруветка на базата на капка 1% разтвор на калиев оксалат и 4 капки разтвор на брилянтно крезил синьо. Добавете 0,04 ml кръв към боята (две пипети до марката 0,02). Сместа се разбърква старателно, но внимателно и се оставя за 30 минути. След това разбъркайте отново и пригответе тънки намазки.

Метод 2 - оцветяване на ретикулоцити в епруветка с Azur II.

Метод 3 - оцветяване на ретикулоцити в епруветка с Azure I.

В момента в търговската мрежа се предлагат готови, фабрични багрила за ретикулоцити. Ретикулоцитите се оцветяват с тях съгласно приложените инструкции.

Брой на ретикулоцитите.

Натривки, приготвени по един от горните методи, се изследват под микроскоп с помощта на потапяща леща. В намазката ретикулоцитите и еритроцитите са оцветени в жълтеникаво-зеленикаво, зърнесто-нишковидното вещество в ретикулоцитите е синьо (когато е оцветено с лазурно II и брилянтно крезилово синьо) или синкаво-виолетово (когато е оцветено с лазурно I).

Снимки на ретикулоцити:

Намерете зрителните полета, където червените кръвни клетки са разположени отделно. В тези зрителни полета е необходимо да се преброят най-малко 1000 червени кръвни клетки и сред тях да се отбележи броят на червените кръвни клетки, съдържащи гранулирано нишковидно вещество. По-голяма точност се получава при преброяване на 2000 - 3000 червени кръвни клетки.

Поради факта, че в зрителното поле има голям брой червени кръвни клетки, което затруднява броенето, се налага ограничаване (намаляване) на зрителното поле. За да направите това, можете да използвате или специален окуляр, в който можете да намалите зрителното поле до необходимия размер, или да използвате специален „прозорец“ (от хартия се изрязва кръг с диаметър, малко по-малък от окуляра, малък диамант се изрязва в центъра на кръга и полученият прозорец се вкарва в окуляра).

Броят на преброените ретикулоцити се изразява на 100 (в проценти) или на 1000 (в ppm) червени кръвни клетки.

Пример:При преброяване на 1000 червени кръвни клетки в цитонамазка беше установено, че 15 червени кръвни клетки от 1000 имат гранулирана мрежеста субстанция в различна степен, т.е. те са ретикулоцити. Следователно броят на ретикулоцитите в този случай е 1,5% или 15‰.

Литература:

Справочник "Лабораторни методи на изследване в клиниката" под редакцията на Меншиков V.V. - Москва, "Медицина", 1987 г.
Любина А. Я., Иличева Л. П. и съавтори - "Клинични лабораторни изследвания" - Москва, "Медицина", 1984 г.

Преброяване на ретикулоцитите с помощта на флуоресцентна микроскопия

Методът за преброяване на броя на ретикулоцитите с помощта на флуоресцентна микроскопия е прост и изисква малко време и е по-точен от конвенционалния метод, тъй като флуоресцентната микроскопия разкрива най-малките зърна от ретикуларно нишковидно вещество.

Ретикулоцити

Ретикулоцитите са млади червени кръвни клетки, образувани след загуба на ядрото на нормобластите. Характерна особеност на ретикулоцитите е наличието в тяхната цитоплазма на гранулирано-нишковидно вещество (ретикулум), което представлява агрегирани рибозоми и митохондрии.

Патологични включвания в червените кръвни клетки

Весели телца (Howell-Jolly bodys) са малки кръгли виолетово-червени включвания с размер µm, открити 1 (по-рядко 2-3) в един еритроцит. Те представляват остатъка от ядрото след отстраняване на неговите RES. Те се откриват при интензивна хемолиза и "претоварване" на RES, след спленектомия, при мегалобластна анемия.

Цитохимично изследване на липиди

Цитохимичното изследване на липидите се основава на използването на мастноразтворими багрила (судан III, судан IV, черен судан и др.). За идентифициране на неутрална мазнина се използва Судан III, който оцветява мазнината в оранжево. Липоидите се откриват по-добре от суданово черно (черно оцветяване).

Анализ на урината според Нечипоренко

Методът на Нечипоренко в домашната лабораторна диагностика е най-разпространеният метод за количествено определяне на формирани елементи в урината. Този метод е най-простият, достъпен за всяка лаборатория и удобен в амбулаторната практика, а също така има редица предимства пред други известни количествени методи за изследване на утайката на урината. По метода на Нечипоренко се определя броят на образуваните елементи (еритроцити, левкоцити и цилиндри) в 1 ml урина.

Ретикулоцит - какво е това в кръвния тест? Стандартни показатели и означение

Ретикулоцитът е предшественик на еритроцит, т.е. еритроцит в млада форма. В кръвта на здрав човек тяхното съдържание е 0,2-1,2%. Това съотношение отразява съдържанието на ретикулоцити в кръвта спрямо червените кръвни клетки. Узряват за 4-5 дни.

Основни понятия

Характерна особеност на младите форми на еритроцитите е, че цитоплазмата съдържа гранулирано-нишковидно вещество, което е агрегирано от рибозоми и митохондрии. Това вещество може да бъде открито с помощта на специален метод за оцветяване на кръвни натривки. Това оцветяване на ретикулоцитите се нарича суправитално, т.е. извършва се без предварително фиксиране на клетките.

Ретикулоцитни групи

Общо експертите разграничават пет основни групи ретикулоцити. Те се различават по ретикулярната мрежа. Плътността и възрастта му са обратно пропорционални: колкото по-дебела е мрежата, толкова по-млади са те. Нека да разберем кой е най-младият ретикулоцит.

Това е клетка, която има мрежа под формата на дебела топка. Тези клетки принадлежат към първата група. Ретикулоцитите от по-зряла форма се появяват под формата на вещество, което има ясно видима мрежа. В четвърта и пета група е представена от отделни нишки и зърна. Най-често кръвта на здрави хора съдържа ретикулоцити от последните групи, тоест по-зрели. По правило те съставляват около 80% от всички останали. С повишена регенерация, която е характерна за някои патологии, броят на ретикулоцитите от първите три групи се увеличава. Такива патологии включват:

Ретикулоцитна криза, придружаваща В12 дефицитна анемия.

Функции, изпълнявани от ретикулоцити

Ретикулоцитът също е еритроцит. Има същата функция като червените кръвни клетки. Тоест, клетките също пренасят кислородни молекули към различни тъкани и органи, но ефективността на този процес е много по-ниска, отколкото когато кислородът се пренася от зрели червени кръвни клетки. Ретикулоцитите могат да адсорбират молекули желязо, съдържащи се в хемоглобина. Това е възможно благодарение на трансферин-чувствителните рецептори. Защо се броят ретикулоцитите? Повече за това по-късно.

Механизъм за вземане на кръвни проби

За определяне на този показател като част от общ анализ се взема кръвна проба. Ако има нужда да се определи нивото на ретикулоцитите, тогава лекарят, който е назначил изследването, посочва необходимостта от допълнително преброяване.

Този тест не изисква специална подготовка, но традиционно се приема на празен стомах сутрин. В същото време, ако има нужда, може да се приема по всяко време на деня. Кръвта за анализ трябва да се вземе от убождане с пръст, изследването му се извършва в лабораторията, в хематологичния отдел.

Броят на ретикулоцитите се преброява в суправитална оцветена цитонамазка. Използва се микроскопичният метод, тоест техният брой просто се преброява чрез поставяне на кръвна проба под микроскоп. Днес има хардуерен метод за броене. Използва се в съвременните лаборатории.

Означението за ретикулоцити в кръвен тест е RET.

Извършване на анализ

Има няколко метода за провеждане на такова изследване:

Стъклото се измива, изсушава и нагрява със специална горелка. След това върху него се нанася една от трите багрила, след което се добавя капка кръв, след което се прави тънко намазка. Стъклото се поставя в петриево блюдо или друга камера за определено време, след което се изсушава на чист въздух.
Ако използвате епруветка, тогава в нея се поставя оцветяващо вещество и там се добавя капка кръв. Сместа трябва да се разбърка. Време за изчакване - от 20 минути до 3 часа, зависи от това какъв реактив се използва. След това течността в епруветката се смесва отново и от нея се вземат петна.

Трудно е да се каже кой метод дава по-точни резултати. И двамата са добри по свой начин, но лекарят може да намери за необходимо да извърши анализа по определен начин, тогава той трябва да посочи това в посоката.

Индикатори

При изчисляване на нивото на ретикулоцитите разликите между половете в нормата са значителни едва след 12 години. До тази възраст нормата за деца от двата пола е една и съща. На около една година момичетата започват менструация, която е редовна. В резултат на месечната загуба на кръв се разширява обхватът на колебанията на еритроидните клетки.

1. При новородени нормата е в диапазона от 0,15 до 1,5%.

2. При деца на две седмици - от 0,45 до 2,0%.

3. При деца на възраст от един до два месеца - от 0,25 до 0,95%.

4. При деца на шест месеца – от 0,2 до 1,0%.

5. При деца от две до шест години - от 0,25 до 0,75%.

6. При деца на възраст от шест до дванадесет години - от 0,25 до 1,3%.

7. При мъже над дванадесет години - от 0,25 до 1,7%.

8. При жени над дванадесет години - от 0,12 до 2,1%.

Какво означава, когато ретикулоцитите са повишени?

Повишен брой ретикулоцити в кръвта

При анемия с различна етиология определянето на броя на ретикулоцитите играе специална роля. Ако съдържанието им в кръвта е повишено, тогава тази патология се нарича ретикулоцитоза. Ако увеличението е придружено от повишаване на нивата на хемоглобина, това показва, че костният мозък има добра регенеративна способност. Това може да се случи, ако са налице следните фактори:

Хемолитична анемия с различна етимология. Това е поредица от заболявания, които се характеризират с разрушаване на червените кръвни клетки. Това явление се нарича хемолиза. В този случай съдържанието на ретикулоцити в кръвта може да достигне 60%. Ако възникне хемолитична криза, тази цифра може да се влоши.

Отравяне с хемотоксини, причиняващи хемолиза. Хемотоксините включват отровата на усойница и някои лекарства, които се използват за лечение на еритремия. Маларийните токсини също могат да причинят хемолиза.

Терапия с леводопа при болест на Паркинсон.

Дългосрочна употреба на определени противовъзпалителни и антипиретични лекарства.

Терапия с препарата "Еритропоетин" при анемични заболявания.

Метастази в костен мозък.

Период на възстановяване след лъчева или химическа терапия.

Ретикулоцитозата може да бъде фалшива или истинска.

Защо да правите тест за ретикулоцити? Този въпрос често се задава.

Фалшива и истинска ретикулоцитоза

Истинската ретикулоцитоза се характеризира с увеличаване на броя на младите ретикулоцити в кръвта, което е придружено от увеличаване на техния брой в костния мозък.

Фалшивата ретикулоцитоза се характеризира с увеличаване на броя на ретикулоцитите изключително в периферната кръв, докато в костния мозък тяхното ниво остава нормално или леко намалено.

Намалена производителност

Процесът на намаляване на броя на ретикулоцитите се наблюдава при потискане на еритропоезата. Възниква в резултат на влиянието на следните фактори:

Дългосрочна употреба на сулфонамиди.

Прием на определени лекарства, като хлорамфеникол или карбамазепин.

Хронични инфекциозни заболявания.

Някои тежки бъбречни заболявания, засягащи еритропоезата.

Микседем или друга дисфункция на щитовидната жлеза.

Тумори в костния мозък.

Разгледахме какво е ретикулоцит. Това е млада червена кръвна клетка в човешката кръв.

Причините за увеличаване на ретикулоцитите, как да се определи функционалността на хемопоетичната система?

Понякога, когато се предписва клиничен преглед, общият кръвен тест може отделно да показва RTC или RET - съкращения, които показват съдържанието на ретикулоцити. Те са безядрени клетки, които предхождат еритроцитите (червените кръвни клетки) в процеса на тяхното образуване. Ретикулоцитите в кръвен тест, техният брой и съотношение с червените кръвни клетки отразяват състоянието и репродуктивната функция на костния мозък, както и цялата хемопоетична система.

Медицинско свидетелство

Можете да определите подробно какво представляват ретикулоцитите по този начин: това са клетки с кръгла или звездовидна форма, които се образуват в костния мозък и се трансформират в червени кръвни клетки под въздействието на гликопротеиновия хормон еритропоетин.

Цветът на ретикулоцитите обикновено е розов със син оттенък. Тяхната отличителна черта от по-късната форма е наличието в структурата на остатъчна РНК, митохондрии и други органели, които изглеждат като гранулирани и нишковидни образувания, чиято загуба показва трансформация в зряла клетка.

Функционалните задължения на ретикулоцитите съвпадат с еритроцитите – да пренасят кислород, но с много по-малка ефективност поради ниското съдържание на хемоглобин в тях. Те са концентрирани главно в червения костен мозък, плоските и тръбестите кости и само зрели червени клетки навлизат в кръвта. Но малка част от незрели ретикулоцити също се допуска в периферния кръвен поток, което показва активиране на процеса на производство на червени кръвни клетки (еритропоеза).

Процесът на образуване на кръв

Еритропоезата започва с трансформацията на еритробласта, клетка, съдържаща ядро, но без хемоглобин, в пронормбласт. След това в еритроидната серия се образува базофилен еритробласт, който вече има предпоставки за хемоглобинизация.

Тъй като предшествениците на червените кръвни клетки натрупват вещество, което задържа кислород (хемоглобин), клетката преминава през етапите на полихроматофилен и след това оксифилен нормобласт. През този период ядрото все още е запазено, чиято инволюция води до образуването на директно млад еритроцит - ретикулоцит, който вече има способността да задържа и транспортира кислород и въглероден диоксид.

Младите червени кръвни клетки остават на мястото на образуването им до 40 часа, след което малка част от тях под въздействието на еритропоетина навлизат в кръвоносните съдове, където се движат свободно в продължение на 1,5-2 дни. През това време клетката губи своя ретикулум (остатъчни нишковидни образувания) и се превръща в еритроцит.

Етапи на развитие на ретикулоцитите

В кръвта ретикулоцитите преминават през пет етапа на съзряване, докато ретикулумът се развива:

нулев етап - когато базофилното вещество (мрежесто вътреклетъчно вещество) има формата на ядро, т.е. натрупването на грануларност изглежда като вид венче;
първият етап - базофилното вещество (BS) придобива мрежеста структура под формата на топка;
втори етап – гранулираната мрежа е равномерно разпределена в клетката;
трети етап - BV изглежда като отделни нишки;
четвърти стадий – BV се разпределя по периферията на клетката под формата на малки зрънца.

В здраво тяло ретикулоцитите в кръвния поток трябва да се намират само в етапи III и IV на зреене (80 процента), а 0 - II в единични копия. Но прекомерната смърт на червените кръвни клетки или кислородното гладуване стимулира повишеното производство на еритропоетин от бъбреците, което води до освобождаване на незрели клетки от всички етапи и дори нормобласти в съдовете.

Кръвен тест за ретикулоцити

Преброяването на ретикулоцитите в кръвна натривка не е необходимо за хематологично изследване, но е част от общия клиничен анализ. Само ако възникнат определени подозрения, лекарят прави специално обозначение в анализа.

Причини за изследването

Причините за изследване на количеството RTC в кръвта са да се провери функционирането на костния мозък и бъбреците при производството на кръвни клетки и еритропоетин в такива случаи:

ако подозирате анемия от различен произход;
ако е необходимо, контролирайте лекарствената терапия за дефицит на желязо, витамин В12 и фолиева киселина;
за наблюдение при прием на еритропоетин-съдържащи лекарства, еритросупресори;
при тежко външно кървене или съмнение за вътрешно кървене;
поради необходимостта от приемане на лекарства, които неутрализират токсините в резултат на ухапвания от отровни насекоми или змии;
за контролиране на производството на червени кръвни клетки по време на трансплантация на костен мозък или бъбрек;
за определяне на рак.

Последната точка е свързана с характеристиките на метастазите на някои ракови тумори в кръвотворните органи.

Метод на откриване

Ако ядрото е загубено, методите за оцветяване само с киселинни багрила са приложими за кръвните клетки. Чрез оцветяване на кръвната натривка се показват елементите на еритроидната серия, които след това се откриват с помощта на светлинна микроскопия. За да се изолират ретикулоцитите от общата маса на червените кръвни клетки, е необходимо да се използват специални препарати, които променят цвета на гранулираната структура на клетките.

Самият процес на откриване се състои в смесване на кръвна плазма с брилянтно крезил синьо или акридиново оранжево багрило in vitro (ин витро) или върху стъкло в пропорции: 1 част кръв към 10 части от веществото.

Методите върху стъкло и ин витро са коренно различни. В първия случай смесени кръвни натривки с багрило се потапят във влажна среда за 10 минути, след което се изсушават и клетките се преброяват под микроскоп. При втория вариант съставът, смесен в епруветка, се оставя до 3 часа, след което се смесва отново, прави се цитонамазка и се брои.

Когато звездните клетки на ретикулоцитите станат различими и се определи степента на тяхната зрялост (по структурата на оцветения BV), може да се получи информация за състоянието на костния мозък.

Приемливи показатели

Нормалното ниво на ретикулоцитите съответства на процеса на кръвообразуване в здраво тяло. За организиране на данните се използва специална таблица, в която нормалните граници са градирани по възраст и пол на лицето.

Нормата на ретикулоцитите в кръвта на децата

Нормата на ретикулоцитите при деца варира в зависимост от конкретния период на образуване на хемопоетичната система. Така при новородени до 14 дни допустимата норма е от 0,15 до 1,5 процента по отношение на червените кръвни клетки. Нормалните стойности за бебета до два месеца са от 0,45 до 2,1 процента, а до шест месеца - 0,25 - 0,9 процента. При дете от шест месеца до една година стойностите от 0,2 до 1% се считат за здрави и се стабилизират до шестгодишна възраст. Освен това диапазонът се стеснява: от 7 до 12 години той варира от 0,2 до 1,3 процента.

Ретикулоцити в кръвта на възрастни

По-нататъшното допустимо съдържание на ретикулоцити в кръвта зависи повече от пола на детето, отколкото от възрастта, и съответства на показателите за възрастни. Това се дължи на началото на менструалния цикъл при момичетата, което предполага месечна загуба на кръв и съответно увеличаване на производството на кръвни клетки през този период. Стандартни показатели:

допустимото ниво на млади червени кръвни клетки в кръвта на жени и млади момичета от 13-годишна възраст ще бъде от 0,12 до 2,05 процента (съответно от 1,2 до 20 ppm);
Нормалният брой на ретикулоцитите при мъжете варира от 0,24 до 1,7 процента от общата еритроидна маса.

По този начин при възрастен се установява постоянен диапазон на допустимата концентрация на млади кръвни клетки, които съдържат гранулирана мрежеста субстанция. В този случай повишените рекулоцити или ретикулоцитната криза показват определени нарушения във функционирането на хемопоетичната система.

Повишени ретикулоцити

Повишените ретикулоцити (или по друг начин ретикулоцитоза) могат да имат както положителни, така и отрицателни последици за субекта. Повишен брой незрели кръвни клетки се наблюдава в следните случаи:

С положителни резултати от терапията с добавки с желязо, витамин В12 и фолиева киселина, които обикновено настъпват в рамките на една седмица.
При попълване на обема на кръвта след значителна загуба на кръв.
С положителни резултати от лечение на онкологични заболявания с противотуморни лекарства или лъчева терапия.

важно! Ретикулоцитозата се наблюдава при недостиг на кислород на значителна надморска височина.

Отрицателните стойности на ретикулоцитозата включват:

Последиците от заболявания като коремен тиф, които провокират вътрешно кървене.
Ретикулоцитите се увеличават при интоксикация с химически отрови или чужди агенти.
Фалшивата ретикулоцитоза показва наличието на незрели клетки в кръвта при липса на такива в костния мозък, което показва възпалителни процеси или метастази в органа.
Ретикулоцитоза се наблюдава при малария, хемолитична анемия или таласемия.

Повишеното съдържание на незрели кръвни клетки в кръвта (ретикулоцитоза) е изпълнено с удебеляване, което впоследствие може да доведе до тромбоза, инфаркт или инсулт.

Ретикулоцити в кръвта по време на бременност

При бременни жени общият обем на кръвта се увеличава поради плазмата, така че се наблюдава неговото разреждане и намаляване на нивото на червените кръвни клетки. Поради факта, че в кръвта няма достатъчно хемоглобин, се развива анемия, която активира процеса на еритропоеза. Следователно бременните жени имат висок процент ретикулоцити. Клиничната картина на това явление съответства на нормата за физиологична адаптация на тялото към раждане на дете.

Ретикулоцитите са ниски

Ретикулоцитопенията (когато нивото на ретикулоцитите е намалено) често показва увреждане на бъбреците и/или костния мозък. Факторите, които намаляват съдържанието на млади червени кръвни клетки, са:

Анемия, причинена от липса на фолиева киселина, витамин В12 или желязо, което води до разрушаване на червените кръвни клетки.
Бъбречни заболявания, но те могат леко да понижат нивото на ретикулоцитите.
Злоупотребата с алкохол, която ще покаже намаляване на RTC поради потискане на бъбречната функция, потискане на костния мозък и директно разрушаване на клетките в резултат на интоксикация.

важно! Злокачествените тумори също могат да намалят нивото на ретикулоцитите в кръвта. Това зависи от областта на костния мозък, в която ракът е метастазирал.

Самото ниво на ретикулоцитите в кръвта не е диагноза. Ако има значително отклонение от допустимия диапазон, той определя общата посока на диагностиката.

Ретикулоцити- млади червени кръвни клетки, образувани след загуба на ядра от нормобласти. Характерна особеност на ретикулоцитите е наличието в цитоплазмата на гранулирано-нишковидно вещество, представляващо агрегирани рибозоми и митохондрии. Това вещество се открива чрез специален метод на оцветяване - суправитален (интравитален), т.е. без предварително фиксиране на клетките. Гранулираната нишковидна субстанция в различни ретикулоцити се характеризира с полиморфизъм; Колкото по-млада е клетката, толкова по-обилно е веществото. В най-младите ретикулоцити има формата на дебела топка, в по-зрелите клетки се появява под формата на мрежа, отделни нишки и след това отделни зърна. В петна, оцветени с конвенционални хематологични методи, ретикулоцитите са сивкаво-розови на цвят - полихроматофилни, т.е. оцветени с различни багрила.

Броят на ретикулоцитите се определя чрез микроскопия на специално оцветени петна

3.2.1 Метод за оцветяване на кръвни натривки за ретикулоцити по Алексеев (броене по Фонио)

Принцип: Методът се основава на преброяване на броя на ретикулоцитите в оцветени кръвни натривки на 1000 червени кръвни клетки. Приготвят се две цитонамазки едновременно (за тромбоцити и ретикулоцити).

Реагент:работен разтвор на боята според Алексеев

Оборудване: микроскоп

Процедура за определяне: Работен разтвор се взема в капиляра за определяне на ESR до 0,75 µl марка и се взема пълна капилярна кръв от пункция на пръста на пациента. Съотношението на багрилото към кръвта е 1:4. Сместа престоява 2 часа, след което се прави тънък намазка върху предметно стъкло. Намазката се изсушава на въздух и се изследва под имерсионна микроскопия.

Брояпроизведени както следва: ретикулоцитните мрежи се оцветяват в синьо. При преброяване на червените кръвни клетки се отчита броят на ретикулоцитите в зрителното поле. Преброяват се 1000 червени кръвни клетки. Резултатът се изразява в проценти.

Стандартна стойност:Кръвта на здрав човек съдържа 0,2-1,0%

(или 2-10 дори разрешени до 12 ppm) ретикулоцити

Клинична и диагностична стойност:Появата на ретикулоцити в периферната кръв показва повишена функция на костния мозък и се използва при оценката на различни видове анемия.

Повишен брой ретикулоцитинаблюдава се след загуба на кръв, с хемолитична анемия

Тежка ретикулоцитоза- отбелязва се при хемолитична жълтеница

Намаляването на броя на ретикулоцитите при наличие на анемия показва апластичен тип хемопоеза.

Въз основа на нивото на ретикулоцитите в кръвта, анемията се разделя на:

- регенеративни(броят на ретикулоцитите 0,5-5% е постхеморагична анемия);

- хиперрегенеративна(брой на ретикулоцитите над 5% е хемолитична анемия);

- хипо- и арегенеративни(броят на ретикулоцитите е намален или липсват, въпреки тежката анемия - хипо- и апластична, желязо- и В12-дефицитна анемия).

внимание! Ретикулоцитозата при липса на анемия показва скрита, но добре компенсирана загуба на кръв.

Принцип на метода

Реактиви

Можете да използвате една от следните бои:

Наситен разтвор на брилянтно крезил синьо в абсолютен алкохол (за да приготвите абсолютен алкохол, трябва да накиснете 96% етанол в няколко промени калциниран меден сулфат на прах). За 100 ml абсолютен алкохол вземете 1,2 g боя.
Разтвор на лазур I: лазур I – 1 g, амониев оксалат – 0,4 g, натриев хлорид – 0,8 g, етилов алкохол 96% – 10 ml, дестилирана вода – 90 ml. Разтворът на боята в затворена бутилка се поставя в термостат при 37°С за 2-3 дни и периодично се разклаща енергично. След това се охлажда до стайна температура и се филтрира през хартиен филтър. Разтворът се съхранява в тъмен стъклен съд. Ако се появи утайка, боята трябва да се филтрира отново.
Azur II разтвор: Azur II – 1 g, натриев цитрат – 5 g, натриев хлорид – 0,4 g, дестилирана вода – 45 ml. Разтворът се оставя в термостат при 37°С в продължение на 2 дни, като се разбърква от време на време. За да се ускори разтварянето, боята може да се загрее на слаб огън за 15 - 20 минути, без да се довежда до кипене. Охлажда се до стайна температура и се филтрира. Съхранявайте в тъмни стъклени съдове.

Специално оборудване

Микроскоп.

Напредък на решимостта

Оцветяването на ретикулоцити се извършва върху стъкло или в епруветка.

Оцветяване на ретикулоцити върху стъкло

Оцветяване на ретикулоцити in vitro

Оцветяването на ретикулоцитите в епруветка се различава, когато се използват различни багрила.

Метод 1 – оцветяване на ретикулоцити в епруветка с брилянтно крезил синьо.

Метод 2 - оцветяване на ретикулоцити в епруветка с Azur II.

Метод 3 - оцветяване на ретикулоцити в епруветка с Azure I.

Брой на ретикулоцитите.

Снимки на ретикулоцити:

Броят на преброените ретикулоцити се изразява на 100 (в проценти) или на 1000 (в ppm) червени кръвни клетки.

Литература:

Справочник "Лабораторни методи на изследване в клиниката" под редакцията на Меншиков V.V. - Москва, "Медицина", 1987 г.
Любина А. Я., Иличева Л. П. и съавтори - "Клинични лабораторни изследвания" - Москва, "Медицина", 1984 г.

Принцип. Суправитално оцветяване с багрила, които разкриват грануларно-ретикуларното вещество на ретикулоцитите.

Реактиви. Можете да използвате едно от следните багрила: 1) наситен разтвор на брилянтно крезил синьо в абсолютен етилов алкохол. За да приготвите абсолютен алкохол, трябва да накиснете 96% етанол в няколко смени калциниран меден сулфат на прах. За 100 ml абсолютен алкохол вземете 1,2 g боя; 2) разтвор на лазур 1 според П. Н. Кориков: лазур I - 1 g; амониев оксалат - 0,4 g; натриев хлорид - 0,8 g; 96% етилов алкохол - 10 ml; дестилирана вода - 90 мл. Разтворът на боята в затворена бутилка се поставя в термостат при 37 °C за 2-3 дни и периодично се разклаща енергично. След това се охлажда до стайна температура и се филтрира през хартиен филтър. Разтворът се съхранява в тъмен стъклен съд. Ако се появи утайка, боята трябва да се филтрира отново; 3) Azur II разтвор: Azur II - 1 g; натриев цитрат - 5 g; натриев хлорид - 0,4 g; дестилирана вода - 45 мл. Разтворът се оставя в термостат при 37 °C в продължение на 2 дни, като се разбърква от време на време. За да се ускори разтварянето, боята може да се загрее на слаб огън за 15-20 минути, без да се довежда до кипене. Охлажда се до стайна температура и се филтрира. Съхранявайте в тъмни стъклени съдове.

Напредък на решимостта. Рисуване върху стъкло.Добре измито и обезмаслено предметно стъкло се нагрява върху пламък на горелка.

С помощта на стъклена пръчка нанесете капка от едно от багрилата върху стъклото и пригответе намазка от боя с помощта на смляно стъкло. Маркирайте страната на стъклото, върху която е нанесен щрихът на боята със стъклограф. В тази форма стъклото може да се подготви за бъдеща употреба и да се съхранява на сухо и тъмно място. Нанесете капка кръв върху петно от боя, пригответе тънко петно от него и незабавно го поставете във влажна камера за 3-4 минути (можете да използвате петриево блюдо с ролки от навлажнена памучна вата, марля или филтърна хартия, поставени покрай ръбовете). След това намазките се изсушават на въздух.

В натривки, приготвени по този начин, червените кръвни клетки са оцветени в жълто-зеленикаво, а гранулираната мрежеста субстанция е синя.

Ин витро оцветяване. Метод 1: преди употреба пригответе работен разтвор на брилянтно крезилово синьо в епруветка със скорост 1 капка 1% разтвор на калиев оксалат и 4 капки разтвор на боя (реагент 1). Добавете 0,04 ml кръв към боята (две пипети до марката 0,02). Сместа се разбърква старателно, но внимателно и се оставя за 30 минути. Разбъркайте и пригответе тънки намазки.

Метод 2: 0,05 ml разтвор на боя 3 и 0,2 ml кръв се поставят в епруветка. Сместа се разбърква старателно и се оставя за 20-30 минути. Разбъркайте и пригответе тънки намазки.

Метод 3: добавете 0,3–0,5 ml разтвор на боя 2 и 5-6 капки кръв в епруветка с помощта на пипета от апарата на Панченков. Епруветката се затваря с гумена запушалка, сместа се разбърква старателно, но внимателно и се оставя за 1–1,5 часа (ретикулоцитите се оцветяват по-добре при експозиция от 1,5–3 часа). Разбъркайте и пригответе тънки намазки.

Брой на ретикулоцитите. В петна червените кръвни клетки са оцветени в жълтеникаво-зеленикаво, гранулираната мрежеста субстанция е синя или синкаво-виолетова.

Натривки, приготвени по един от горните методи, се изследват под микроскоп с помощта на потапяща леща. Необходимо е да се преброят най-малко 1000 червени кръвни клетки (по-голяма точност се получава при преброяване на 2000–3000 червени кръвни клетки) и да се отбележи сред тях броят на клетките, съдържащи гранулирано-ретикуларно вещество. На практика за по-голяма точност се използва специален окуляр, при който зрителното поле може да се намали до необходимия размер. За равномерни тънки петна, в които червените кръвни клетки са разположени в един ред, изберете зрително поле, в което има например 50 червени кръвни клетки, и след това изчислете 20 такива зрителни полета.

Ако нямате готов окуляр, можете лесно да го подготвите, като развиете окуляра 7×, пъхнете в него лист хартия с изрязан квадрат и го завиете. Броят на преброените ретикулоцити се изразява на 1000 или на 100 червени кръвни клетки.