Bakteriologiniai tyrimai. Bakteriologiniai tyrimai: ką sako testai

Bakterijų tyrimas žmogui turi didelę praktinę reikšmę. Atidaryta šiandien didelis skaičius prokariotai, kurie skiriasi vienas nuo kito patogeniškumu, pasiskirstymo sritimi, forma, dydžiu, žvynelių skaičiumi ir kitais parametrais. Norint išsamiai ištirti šią padermę, naudojamas bakteriologinis tyrimo metodas.

Kokie yra ląstelių metodai?

Norint nustatyti, ar bakterijos yra patogeniškos, atliekamas kultūros tyrimas. Skirtingi keliai. Tarp jų:

1. Bakterioskopinis metodas.

2. Bakteriologinis metodas.

3. Biologinis metodas.

Bakterioskopiniai ir bakteriologiniai yra tiesiogiai pagrįsti darbu su prokariotinėmis ląstelėmis, kai reikia atlikti biologinę analizę, norint ištirti tokių ląstelių poveikį gyvam eksperimentinių gyvūnų organizmui. Remdamasis tam tikrų ligos požymių pasireiškimo laipsniu, mokslininkas gali daryti išvadą apie patogeninių bakterijų buvimą ar nebuvimą mėginyje, taip pat natūraliai jas daugintis gyvūno kūne, kad gautų jų kultūrą ir panaudotų kituose darbuose.

Bakteriologinio tyrimo metodas skiriasi nuo bakterioskopinio. Pirmajame analizei naudojama specialiai paruošta gyvų prokariotų kultūra, o antrajame – darbas su negyvomis arba gyvomis ląstelėmis ant stiklelio.

Bakteriologinio tyrimo metodo etapai. Mikrobiologija

Bakterijų kultūros savybių tyrimo principas gali būti naudingas tiek mikrobiologams, kurie užsibrėžė tikslą tirti prokariotines ląsteles, tiek laboratorijos specialistams, kurių užduotis – nustatyti bakterijų patogeniškumą ar nepatogeniškumą, o vėliau ir paciento diagnozę. .

Bakterijų tyrimo metodika suskirstyta į tris etapus:

1. Bakterijų išskyrimas iš pradinio mėginio.

2. Bakterijų sėjimas ir jų savybių auginimas bei tyrimas.

3. Detalus bakterijų ląstelių tyrimas.

Pirmas lygmuo

Mėginys arba tepinėlis imamas nuo laisvo terpės paviršiaus arba iš paciento. Taip gauname „kokteilį“ iš daugelio rūšių bakterijų, kurias būtina pasėti maistinė terpė. Kartais atsiranda galimybė nedelsiant išskirti reikalingas bakterijas, žinant jų pasiskirstymo organizme sritis.

Po dviejų ar trijų dienų atrenkamos reikiamos kolonijos ir sterilia kilpa sėjamos į kietą terpę Petri lėkštelėse. Daugelis laboratorijų dirba su mėgintuvėliais, kuriuose gali būti kietų arba skystų maistinių medžiagų. Taip atliekamas bakteriologinis mikrobiologijos tyrimo metodas.

Antrasis etapas

Gavus atskiras bakterijų kolonijas, atliekama tiesioginė makro- ir mikroanalizė. Išmatuojami visi kolonijų parametrai, nustatoma kiekvienos iš jų spalva ir forma. Dažnai kolonijos skaičiuojamos Petri lėkštelėje ir tada pradinėje medžiagoje. Tai svarbu analizuojant patogenines bakterijas, kurių skaičius lemia ligos laipsnį.

Bakteriologinis tyrimo metodas, kurio 2 etapas – atskirų mikroorganizmų kolonijų tyrimas, gali būti derinamas su biologiniu bakterijų analizės metodu. Kitas šio etapo darbo tikslas – padidinti pradinės medžiagos kiekį. Tai galima padaryti maistinėje terpėje arba galite atlikti eksperimentą natūraliomis sąlygomis su gyvais eksperimentiniais organizmais. Patogeninės bakterijos dauginsis, todėl kraujyje bus milijonai prokariotinių ląstelių. Iš paimto kraujo nesunku paruošti bakterijoms reikalingą darbinę medžiagą.

Trečias etapas

Svarbiausia tyrimo dalis – bakterijų kultūros morfologinių, biocheminių, toksikogeninių ir antigeninių savybių nustatymas. Darbas atliekamas su anksčiau „išgrynintomis“ kultūromis ant maistinės terpės, taip pat su preparatais (dažnai dažytais) mikroskopu.

Bakteriologinio tyrimo metodas leidžia nustatyti, ar patogeninės ar oportunistinės bakterijos priklauso vienai ar kitai sisteminei grupei, taip pat nustatyti jų atsparumą vaistams. 3 etapas - antibiotikai, ty bakterijų ląstelių elgesio sulaikymo sąlygomis analizė vaistai aplinkoje.

Kultūros atsparumo antibiotikams tyrimas turi didelę praktinę reikšmę, kai reikia skirti būtinus, o svarbiausia, veiksmingi vaistai. Čia gali padėti bakteriologinio tyrimo metodas.

Kas yra maistinė terpė?

Norint vystytis ir daugintis, bakterijos turi būti iš anksto paruoštose sąlygose.Jos gali būti skystos arba kietos konsistencijos, augalinės ar gyvūninės kilmės.

Pagrindiniai mitybos terpės reikalavimai:

1. Sterilumas.

2. Maksimalus skaidrumas.

3. Optimalūs rūgštingumo, vandens aktyvumo ir kitų biologinių kiekių rodikliai.

Išskirtų kolonijų gavimas

1. Drigalskio metodas. Jį sudaro tepinėlis su įvairių tipų mikroorganizmai. Ši kilpa praleidžiama per pirmąją Petri lėkštelę su maistine terpe. Toliau, nekeičiant kilpos, antroje ir trečioje Petri lėkštelėse atliekamas likutinės medžiagos metodas. Taigi paskutiniuose kolonijos mėginiuose bakterijos nebus pasėtos per tankiai, taip supaprastinant galimybę surasti darbui reikalingas bakterijas.

2. Kocho metodas. Tam naudojami mėgintuvėliai su išlydyta maistine terpe. Ten dedama kilpa arba pipetė su bakterijų tepinėliu, po to mėgintuvėlio turinys supilamas ant specialios plokštelės. Agaras (arba želatina) po kurio laiko sukietėja, o jo storyje nesunku aptikti norimas ląstelių kolonijas. Prieš pradedant darbą svarbu atskiesti bakterijų mišinį mėgintuvėliuose, kad mikroorganizmų koncentracija nebūtų labai didelė.

Kurių etapai yra pagrįsti norimos bakterijų kultūros išskyrimu, neapsieina be šių dviejų izoliuotų kolonijų radimo būdų.

Antibiotikograma

Vizualiai bakterijų reakciją į vaistus galima pastebėti dviem praktiniais būdais:

1. Popierinio disko metodas.

2. Bakterijų ir antibiotiko skiedimas skystoje terpėje.

Popierinio disko metodui reikalinga mikroorganizmų kultūra, kuri buvo auginama kietoje maistinėje terpėje. Ant tokios terpės uždedami keli apvalios formos popieriniai, impregnuoti antibiotikais. Jei vaistas sėkmingai neutralizuoja bakterijų ląsteles, po tokio gydymo atsiras plotas, kuriame nėra kolonijų. Jei reakcija į antibiotiką yra neigiama, bakterijos išgyvens.

Jei naudojama skysta maistinė terpė, pirmiausia paruoškite kelis mėgintuvėlius su bakterijų kultūra skirtingi laipsniai veisimas. Į šiuos mėgintuvėlius įpilama antibiotikų, o medžiagos ir mikroorganizmų sąveikos procesas stebimas 24 valandas. Galiausiai gaunama aukštos kokybės antibiograma, iš kurios galima spręsti apie vaisto veiksmingumą tam tikram derliui.

Pagrindinės analizės užduotys

Bakteriologinio tyrimo metodo tikslai ir etapai čia surašyti taškais.

1. Gaukite pradinę medžiagą, kuri bus naudojama bakterijų kolonijoms išskirti. Tai gali būti bet kokio daikto paviršiaus, gleivinės ar žmogaus organo ertmės tepinėlis arba kraujo tyrimas.

2. ant kietos maistinės terpės. Po 24–48 valandų Petri lėkštelėje galima aptikti bakterijų kolonijų skirtingi tipai. Pagal morfologinius ir/ar biocheminius kriterijus parenkame mums reikalingą ir su juo atliekame tolesnį darbą.

3. Gautos kultūros dauginimas. Bakteriologinio tyrimo metodas gali būti pagrįstas mechaniniu arba biologiniu bakterijų kultūrų skaičiaus didinimo metodu. Pirmuoju atveju dirbama su kietomis arba skystomis maistinėmis terpėmis, ant kurių termostate dauginasi bakterijos ir suformuoja naujas kolonijas. Biologinis metodas reikalauja gamtinės sąlygos bakterijų skaičiaus padidėjimas, todėl čia eksperimentinis gyvūnas užsikrečia mikroorganizmais. Po kelių dienų kraujo mėginyje arba tepinėlyje galima aptikti daug prokariotų.

4. Darbas su išgryninta kultūra. Norint nustatyti sisteminę bakterijų padėtį, taip pat jų priklausymą patogenams, būtina atlikti išsamią ląstelių analizę pagal morfologines ir biochemines savybes. Tiriant patogenines mikroorganizmų grupes, svarbu žinoti, koks efektyvus yra antibiotikų veikimas.

Tai buvo bendrosios charakteristikos bakteriologinio tyrimo metodas.

Analizės ypatybės

Pagrindinė bakteriologinių tyrimų atlikimo taisyklė – maksimalus sterilumas. Jei dirbate su mėgintuvėliais, bakterijas sėti ir persėti reikia tik virš įkaitintos spiritinės lempos.

Visiems bakteriologinio tyrimo metodo etapams reikia naudoti specialią kilpą arba Pasteur pipetę. Abu instrumentai turi būti iš anksto apdoroti alkoholio lempos liepsna. Kalbant apie Pasteur pipetę, prieš terminę sterilizaciją reikia pincetu nulaužti pipetės galiuką.

Bakterijų sėjimo technika taip pat turi savo ypatybių. Pirma, sėjant ant kietos terpės, bakterinė kilpa praeina per agaro paviršių. Žinoma, kilpos paviršiuje jau turėtų būti mikroorganizmų mėginys. Taip pat praktikuojama inokuliacija į auginimo terpę, tokiu atveju kilpa arba pipetė turi pasiekti Petri lėkštelės dugną.

Dirbant su skysta terpe, naudojami mėgintuvėliai. Čia svarbu užtikrinti, kad skysčiai neliestų laboratorinių stiklinių indų ar kamščių kraštų, o naudojami instrumentai (pipetė, kilpa) nesiliestų. pašalinių daiktų ir paviršiai.

Biologinio tyrimo metodo svarba

Bakterijų mėginio analizė turi savo praktinis naudojimas. Visų pirma, bakteriologinio tyrimo metodas gali būti naudojamas medicinoje. Pavyzdžiui, norint nustatyti, būtina ištirti paciento mikroflorą teisinga diagnozė, taip pat sukurti teisingą gydymo kursą. Čia padeda antibiograma, kuri parodys vaistų aktyvumą prieš ligos sukėlėją.

Tokiems nustatyti laboratorijoje naudojamas bakterijų tyrimas pavojingų ligų kaip tuberkuliozė, pasikartojantis karščiavimas arba gonorėja. Jis taip pat naudojamas tiriant tonzilių ir organų ertmių bakterinę sudėtį.

Aplinkos užterštumui nustatyti gali būti taikomas bakteriologinio tyrimo metodas. Remiantis duomenimis apie kiekybinę ir kokybinę tepinėlio iš objekto paviršiaus sudėtį, nustatomas tam tikros aplinkos mikroorganizmų populiacijos laipsnis.

Bandymas, naudojamas patogeninėms bakterijoms nustatyti medžiagoje iš sergančių gyvūnų ar jų lavonų, mikrobų aptikimui objektuose išorinė aplinka, pašarai, mėsa ir tt Mėginių ėmimo pobūdis ir metodika, medžiagos siuntimo būdas įvairioms infekcinėms ligoms nėra tas pats, bet jie egzistuoja Bendrosios nuostatos, į kurį būtina atsižvelgti nepriklausomai nuo tyrimo objekto ir medžiagos savybių. Jei įmanoma, tiriamoji medžiaga surenkama aseptinėmis sąlygomis į sterilius indus ir kuo greičiau pristatoma kartu su lydimuoju dokumentu į laboratoriją (jame nurodoma paėmimo data, medžiagos pobūdis ir šaltinis, pagrindinė Klinikiniai požymiai ligos ir patologiniai pakitimai, tyrimo tikslas). B. ir. apima 3 pagrindinius metodus: tepinėlių iš patologinės ar kitos tiriamosios medžiagos mikroskopiją (bakterioskopiją); grynos bakterijų kultūros išskyrimas, vėliau tiriant bakterijų morfologines, kultūrines-biochemines, antigenines ir patogenines savybes.

Bakteriologiniai tyrimai jie prasideda mikroskopija, kuri leidžia aptikti medžiagoje esančius mikrobus ir ištirti jų morfologiją (formą, dydį, struktūrą). Mikroskopuojant patologinę medžiagą, pirštų atspaudų tepinėliai ruošiami iš organų, audinių arba ploni kitos tiriamos medžiagos tepinėliai, džiovinami ore, fiksuojami (dažniausiai liepsna) ir nudažomi vienu ar kitu būdu, priklausomai nuo tyrimo židinio (žr. mikroorganizmų). Norint aptikti tam tikras bakterijas (pavyzdžiui, tuberkuliozės sukėlėją), patologinė medžiaga iš anksto apdorojama vienu iš sodrinimo būdų, siekiant padidinti bakterijų koncentraciją joje ir atsikratyti pašalinių mikrobų. Fluorescencinė mikroskopija naudojama greitai aptikti bakterijas. Bakterijų judrumui dėl žvynelių buvimo tirti taikoma jaunos (12-24 val.) gyvos kultūros mikroskopija, naudojant pakabinamus lašus arba susmulkintus lašų preparatus. Bakterijų mobilumą taip pat galima nustatyti remiantis kultūros augimo pusiau skystame MPA ypatumais. Bakterijų kultūros išskyrimas atliekamas sėjant medžiagą ant maistinių medžiagų. Siekiant palengvinti ir paspartinti bakterijų išskyrimą, naudojamos diferencinės diagnostinės ir selektyvinės maistinės terpės (kietos ir skystos), kuriose tam tikros rūšies bakterijos gamina jiems būdingą augimą (o svetimų mikrobų augimas sulėtėja). Sėjama ant kietų maistinių medžiagų terpės bakteriologiniuose induose, mentele įtrinant terpės paviršių keliais lašais medžiagos. Tiriant nugaišusių ar nugaišusių gyvūnų parenchiminius organus, organo gabalas sudeginamas arba flambiruojamas, po to perpjaunamas steriliomis žirklėmis ir, naudojant pincetą, nupjautas paviršius perleidžiamas išilgai maistinės terpės inde. Medžiaga pasėjama į skystą terpę naudojant Pasteur pipetę. Norint gauti izoliuotų mikrobų kolonijų augimą kietoje terpėje ir atskirti tiriamas bakterijas nuo lydinčių mikroorganizmų, dalinis sėjimas atliekamas Drigalsky metodu. Inokuliuoti indai ir mėgintuvėliai termostate inkubuojami kiekvienos rūšies bakterijų augimui optimalioje temperatūroje (dažniausiai 37°C) 1-2 paras, kai kuriais atvejais (tuberkuliozės bakterijos) – iki 3-4 savaičių. Ilgiausias ir sunkiausias etapas B. ir. - atrinktų kultūrų bendras ir rūšių identifikavimas. Tiriamos tik grynosios kultūros, gautos po subkultūros iš vienos kolonijos ir turinčios identiškas morfologines bei tintoriaus savybes (žr. Mikrobų identifikavimas). Kultūros antigeninės savybės tiriamos agliutinacijos reakcijoje. Bakterijų patogeninių savybių nustatymas atliekamas užkrečiant laboratorinius gyvūnus kultūra arba kultūros filtratu (nustatant toksinų susidarymą).

Ištyrus bakterijų savybes, gauti duomenys lyginami su bakterijų charakteristikomis, esančiomis klasifikacijos schemose ar mikrobų identifikavimo vadovuose (D. Bergi, 1974; N. A. Krasilnikov, 1949 ir ​​kt.), atliekama jų bendrinė ir rūšinė diferenciacija. išeiti. Abejotinais atvejais medžiaga nagrinėjama iš naujo. Rezultatai B. ir. įrašomi registracijos žurnale arba laboratorinio tyrimo formoje, kurios išvadoje nurodo, kuris mikrobas buvo išskirtas iš tiriamos medžiagos. Diagnozė įjungta infekcinė liga galima tik atsižvelgiant į epidemiologinius, klinikinius ir patologinius duomenis.

Bakteriologiniai tyrimai – tai tyrimas, skirtas išskirti ir ištirti jų savybes, kad būtų galima nustatyti mikrobiologinę diagnozę.

Tiriamąją medžiagą reikia surinkti aseptinėmis sąlygomis į sterilius konteinerius ir kuo greičiau pristatyti į laboratoriją. Jei reikia, mėginiai turi būti laikomi šaldytuve. Mėginių ėmimo technika priklauso nuo objekto, ligos pobūdžio ir mikroorganizmo savybių. Vienas iš įprastų bakteriologinių tyrimų metodų yra bakterioskopija.

Nefiksuotų bakterijų tyrimui naudojami du metodai: susmulkintas lašas (tarp stiklelio ir dengiamojo stiklo) ir . Reikia atsiminti, kad nefiksuotų bakterijų preparatai yra infekciniai.

Fiksuotų preparatų bakterioskopijai naudojami tepinėliai. Norint juos paruošti, stiklelio paviršiuje paskirstomas lašelis tiriamojo skysčio ir po to išdžiovinamas. Dažniausias vaisto fiksavimo būdas yra perleisti jį per dujų degiklio liepsną. Kai kuriais atvejais naudojami tvirtinimo junginiai. Fiksuoti preparatai dažniausiai yra dažomi (žr. Mikroorganizmų dažymas). Prie numerio esminiai elementai Bakteriologiniai tyrimai apima inokuliacijas ir subkultūras, atliekamas su bakterine kilpa arba Pasteur pipete. Kilpa sterilizuojama atkaitinant liepsnoje, po to atšaldoma paliečiant nesokuliuoto agaro plotą arba nuplaunant steriliu skysčiu. Naudodami Pasteur pipetę, pincetu nulaužkite jos galiuką, kelis kartus perleiskite pipetę per degiklio liepsną ir leiskite atvėsti. Sėjant naudojamos skystos ir kietos maistinės terpės. Sėjant ant pasvirusio agaro, bakterijų kultūra trinamas kilpa per agaro paviršių. Sėjant į agaro ar želatinos kolonėlės storį, maistinė terpė kilpa arba specialia adata perveriama į vamzdelio dugną. Sėjant į skystą terpę reikia pasirūpinti, kad skystis neišsilietų ir nesušlapintų vamzdelių bei kamščių kraštų. Skiepijimas ir subkultūros turi būti atliekamos prie dujinio degiklio liepsnos, mėgintuvėliai neturi likti ilgai atidaryti, kilpa ar Pasteur pipetė su kultūra neturi nieko liesti; Prieš uždarant mėgintuvėlį, jo kraštus reikia sudeginti. Inokuliuoti mėgintuvėliai turi būti nedelsiant paženklinti.

Svarbiausias bakteriologinių tyrimų etapas yra identifikavimas – grynosios kultūros pavidalu gautų bakterijų rūšies ar tipo nustatymas. Nustatant bakterijas, jų fiziologiniai ir biochemines savybes, toksinų susidarymas. Plačiai naudojami serologiniai bakterijų (reakcijų ir) nustatymo metodai. Daugeliu atvejų efektyvus yra biologinis mikroorganizmų nustatymo metodas, pagrįstas laboratorinių gyvūnų užkrėtimu tiriama medžiaga arba gauta bakterijų kultūra ir būdingų patologinių gyvūnų pakitimų nustatymu.

Grynosioms kultūroms išskirti naudojami mechaniniai ir biologiniai metodai. Mechaninio metodo pavyzdys: bandomosios medžiagos lašas sumalamas ta pačia sterilia mentele arba bakterine kilpa ant tankios maistinės terpės paviršiaus iš eilės pirmoje, antroje ir trečioje. Gryna kultūra išskiriama iš užaugintų atskirų kolonijų, kurias sudaro jų tyrimas ir atranka šviežioje maistinėje terpėje. Biologiniai grynųjų kultūrų išskyrimo metodai yra pagrįsti atsižvelgimu į vieną ar kitą išskirto mikrobo savybę, kuri išskiria jį iš kitų tiriamoje medžiagoje aptinkamų mikrobų.

Taikant biologinį metodą, naudojamos tokios maistinės terpės, kuriose susidaro palankios sąlygos tam tikros rūšies mikrobų vystymuisi. Biologiniai metodai taip pat apima laboratorinių gyvūnų, jautrių izoliuotoms bakterijų rūšims, užkrėtimą.

Bakteriologiniai tyrimai – identifikavimo metodų visuma patogeniniai mikroorganizmai paciente, nešioklyje arba ant aplinkos objektų. Bakteriologiniai tyrimai taip pat naudojami aptikti oportunistinius ir sanitariškai orientacinius mikrobus, apibūdinančius išorinės aplinkos užterštumo laipsnį, tirti tam tikros aplinkos (objekto) mikrobinį kraštovaizdį. Bakteriologiniai tyrimai gali būti naudojami diagnostikai, profilaktikai užkrečiamos ligos, sanitarinėms ir higieninėms aplinkos charakteristikoms, supančios žmogų, moksliniams tyrimams.

Bakteriologinio tyrimo medžiaga ir metodas priklauso nuo analizės tikslo, aplinkos sąlygų, patogenezės ir ligos eigos. Jei yra bakteriemija, mikrobas aptinkamas naudojant kraujo pasėlį. Esant sunkiems vietiniai pažeidimai Ligos sukėlėjo reikia ieškoti pažeisto organo išskyrose ar sekretuose (difterija, dizenterija, gonorėja ir kt.). Galiausiai, sergant sudėtingos eigos ligomis, kai (pvz., sergant vidurių šiltine) bakteriemiją pakeičia pažeidimai plonosios žarnos, kiekviename etape naudojamas atitinkamas tyrimo metodas: pirmąją ligos savaitę atliekami kraujo pasėliai, antrąją – patikimiausiai serologinis tyrimas, nuo trečios savaitės išmatų pasėlis gaunamas teigiamas rezultatas; Pastarasis metodas taip pat naudojamas kaip kontrolinis tyrimas, siekiant nustatyti bakterijų nešiotojus tarp sveikstančių ir juos stebėti.

Bet kuri iš šių užduočių atliekama naudojant mikroorganizmų išskyrimo ir nustatymo metodus. Priklausomai nuo mikrobo savybių, naudojamas visas metodų kompleksas arba jo dalys.

Bakterioskopija yra labiausiai prieinamas metodas, pagrįstas medžiagos mikroskopiniu tyrimu. Mikroskopuojant šviežius preparatus galima naudoti kai kurias mikrochemines reakcijas (pavyzdžiui, jodofilinių bakterijų dažymą Lugolio tirpalu) arba selektyvų skirtingų struktūrinių bakterijų dalių dažymą.

Bakterijas galima aiškiau identifikuoti spalvotame preparate. Bandoma medžiaga plonu ir kuo lygesniu sluoksniu užtepama ant stiklelio. Leiskite preparatui išdžiūti ir sutvirtinkite jį vienu iš visuotinai priimtų metodų, bet dažniausiai liepsnodami, ty du ar tris kartus greitai perbraukdami preparatą per degiklio liepsną, kad stiklas būtų šiltas, bet ne karštas. Po fiksacijos atvėsintas preparatas nudažomas paprastu arba diferenciniu beicu (žr. Mikroorganizmų dažymas). Fluorescencinei mikroskopijai naudojami ir natūralūs, ir sausi preparatai. Šiuo atveju, apdorojant tam tikrais dažais, mikrobų kūno struktūros arba visas mikrobas švyti ultravioletiniais arba trumpais mėlynais spinduliais. Kitoje modifikacijoje mikrobai apdorojami specifiniais serumais, paženklintais fluorescentais (dažais). Serumą atitinkančios bakterijos švytės, kai ant jų nusėda pažymėtas serumas. Heterologinės bakterijos nešvytės.

Bakterioskopijos metodas plačiai taikomas tam tikrų infekcinių ligų (gonorėjos, tuberkuliozės, recidyvuojančios karščiavimo) bakteriologinei diagnostikai, taip pat visam organo (tonzilių, makšties), produkto ar kito objekto mikrofloros kompleksui tirti.

Sėjos metodas, ty norimo mikroorganizmo grynosios kultūros išskyrimas, yra tikslesnis ir patikimesnis bakteriologinės diagnostikos metodas nei bakterioskopija. Šviežia medžiaga paskirstoma ant tankios maistinės terpės, pilamos į Petri lėkštelės, paviršiuje. Pirminis sėjimas atliekamas įprastoje terpėje, palankioje tam tikram mikrobui, ant diferencinės arba selektyvios terpės. Maistinės terpės pasirinkimas (žr.), taip pat šviežios sėjos medžiagos išankstinio apdorojimo būdas priklauso nuo jos užterštumo laipsnio kartu su svetima mikroflora. Per 24-48 valandas. laikomi termostate esant optimaliai tam tikram mikrobui temperatūrai, taurelės yra tiriamos ir įtartinos kolonijos iš naujo auginamos dauginimuisi palankioje terpėje. šio patogeno. Tokiu būdu gaunama vienalyčių bakterijų kultūra, kurią būtina identifikuoti.

Mikrobo identifikavimas pradedamas tiriant jo morfologiją spalvotame preparate ir susmulkintame laše (žr.), siekiant nustatyti mikrobų formą ir judrumą. Kitas žingsnis – ištirti bakterijų fermentinį gebėjimą skaidyti angliavandenius, aminorūgštis ir karbamidą kiekvienam tipui būdinguose deriniuose. Bakterijose labiausiai ištirtas cukrus ir proteolitiniai fermentai.

Mikrobo identifikavimas turi būti papildytas kitų kiekvienai mikroorganizmų genčiai ir tipui būdingų savybių tyrimu. Šios savybės apima gebėjimą selektyviai ištirpinti skirtingų gyvūnų raudonuosius kraujo kūnelius (hemolizė), krešulio kraujo plazmą (plazmos krešėjimą), ištirpinti fibrino krešulį (fibrinolizė) ir kt. Visos šios bakterijų savybės gali būti naudojamos nustatant jas kaip skirtingus požymius. .

Galutinis kai kurių mikrobų rūšių, daugiausia patogeninių koliforminių bakterijų, identifikavimas apima serologinį identifikavimą (žr. Mikrobų identifikavimą). Paprastai šiuo tikslu atliekama agliutinacijos reakcija, t.y. nustatomas bakterijų susitelkimas veikiant to paties pavadinimo imuniniam serumui. Mikrobų agliutinacija serume prieš tam tikrą rūšį rodo priklausymą tai rūšiai. Paprastai agliutinacijos reakcija atliekama maždaug ant stiklo ir galutiniam nustatymui mėgintuvėliuose su serumo praskiedimu.

Kai kurių mikrobų neįmanoma visiškai nustatyti aprašytu būdu. Tada identifikavimas turi būti papildytas laboratorinių gyvūnų užkrėtimu, nes kai kurioms bakterijoms būdingas patogeniškumas arba toksiškumas, kuris atsiskleidžia užsikrėtus gyvūnams. Kai kuriais atvejais gyvūnų užkrėtimas taip pat yra patogeninių mikrobų kaupimosi būdas.

Tik palyginus visas kultūros charakteristikas, surinktas tiriant jos morfologiją, biochemines, serologines ir, jei reikia, biologines savybes, galima identifikuoti. Atsakykite kada teigiamas rezultatas tyrimas nėra sunkus, jei izoliuotas mikrobas yra tipiškas. Tokiu atveju nurodykite bakterijos gentį, rūšį ir, jei nustatyta, tipą. Kai išskiriamas mikrobas, kurio kai kurios savybės nukrypsta nuo tipinės charakteristikos, pateikiamas atsakymas, nurodantis deviantinę charakteristiką. Tokiu atveju pravartu tyrimą pakartoti, jei tai leidžia ligos eiga ar medžiagos rinkimo sąlygos. Taip pat naudinga netipinių mikrobų kultūrą papildomai tirti kitais, sudėtingesniais metodais.

Neigiami bakteriologinio tyrimo rezultatai yra santykinai svarbūs ir tik parodo, kad tirtoje medžiagos dalyje nebuvo reikiamų mikrobų arba ji buvo negyvybinga. Tačiau jie gali būti kitoje dalyje. Todėl, pavyzdžiui, tiriant, ar nėra bacilų nešiojimo ( vidurių šiltinės, dizenterija, difterija) būtini pakartotiniai tyrimai.

Bakteriologinių tyrimų pagalba tiriamos įvairių bakterijų savybės, taip nustatoma teisinga mikrobiologinė diagnozė. Naudojant šį tyrimo metodą, galima nustatyti ligą pagal ankstyvosios stadijos jo plėtra.

Norint atlikti bakteriologinį tyrimą, būtina paimti bakterijų kultūrą iš gerklės ar nosies. Iš vyriškos lyties atstovų galima paimti spermą analizei, kuri gali būti panaudota aptikti Trichomonas. Šis tyrimas ne tik gali nustatyti patogeninių mikroorganizmų koncentraciją medžiagoje, kuri paimama analizei. Naudodamiesi šiuo tyrimu galite ištirti vyrų ir moterų lytinių organų išsiskyrimą, taip pat smegenų skystį, kraują ir skreplius.

Žaliavos bakteriologinei analizei gali būti paimtos iš:

• Išangės anga (kalla).
• Iš burnos, nosies ir lytinių organų (ryklės) gleivinės.
• Nuo žmogaus žaizdų.

Ačiū aukštas lygisŠio tyrimo efektyvumą užtikrina grybų ir bakterijų rūšių aptikimas.

Virusai nustatomi atsižvelgiant į jų itiologijos sudėtingumą. Įtarus kokią nors ligą, pagal gydytojo nurodymą atliekamas bakteriologinis tyrimas. Pasirinktos rūšysŠis tyrimas atliekamas reguliariai (pavyzdžiui, kartą per metus atliekamas kiaušinėlių tyrimas).

Bakterijų kultūros pasėjamos naudojant bakteriologinę kilpą arba Pasteur pipetę.

Prieš analizę bakteriologinė kilpa gali būti sterilizuojama kaitinant liepsna, o po to kilpa vėsinama paliečiant nesėtą angarą. Tada šis instrumentas nuplaunamas specialiu steriliu skysčiu.

Jei tyrimams naudojama Pasteur pipetė, jos galiuką reikia nulaužti pincetu. Tada pipetė kurį laiką palaikoma virš liepsnos.

Bakterijų sėjimui būdingas skystų ir kietų terpių naudojimas. Bakterijų kultūra sumalama ant agaro paviršiaus. Tam naudojama kilpa. Jei sėjama į agaro arba želatinos kolonėlę, maistinė terpė praduriama aštria adata arba kilpa. Jei inokuliacija atliekama skystoje terpėje, būtina užtikrinti, kad mėgintuvėlio kraštai nebūtų sudrėkinti šio skysčio. Jei kultūros imamos į mėgintuvėlius, jų negalima palikti atviroje padėtyje. ilgas laikas, nes tai gali neigiamai paveikti tyrimo rezultatus.

Įdėjus kultūrą į mėgintuvėlį, ji nedelsiant pasirašoma. Tada nustatoma bakteriologinė kultūra. Šiuo tikslu biocheminiai ir fiziologines savybes bakterijos. Labai dažnai, kai Šis tyrimas naudojamas serologinis identifikavimo metodas. Biologinio identifikavimo metodas taip pat yra labai efektyvus. Ją sudaro gyvūnų užkrėtimas tiriama medžiaga. Grynosioms kultūroms išskirti naudojamas identifikavimo metodas.

Identifikavimo metodų tipai:

1. Mechaninis identifikavimo metodas susideda iš tiriamos medžiagos trynimo per tankios terpės paviršių. Šiam veiksmui atlikti dažniausiai naudojama bakterinė kilpa arba sterili mentelė.
2. Taikant biologinio identifikavimo metodą, būtina sukurti tokią aplinką, kuri bus naudingiausia bakterijų vystymuisi.

Nepriklausomai nuo tyrimo metodo, turi būti naudojami tik sterilūs ir termiškai apdoroti instrumentai. Dėl to galite gauti teisingą ir tikslius rezultatus tyrimai, kurie leis nustatyti teisingą diagnozę ir paskirti racionalų gydymą.

LAC šlapimo analizė yra viena iš efektyviausių ir tikslūs tipai jos mėginio diagnostika. Naudojamas identifikuoti Įvairios rūšysžmogaus kūno šlapimo sistemos infekcijos. Šią sistemą sudaro poros inkstų, šlapimtakių, šlapimo pūslės ir šlaplės. Pagrindinė žmogaus organizmo šlapimo sistemos funkcija yra šlapimo susidarymo procesas, taip pat jo kaupimasis ir išleidimas į išorinę aplinką.

Kas tai yra?

Kaip minėta pirmiau, bakteriologinė šlapimo analizė leidžia nustatyti infekcijų buvimą organizme. Pagrindinis jo skirtumas nuo kitų tyrimų rūšių yra tyrimo trukmė – dešimt dienų. Laboratorinėmis sąlygomis šlapimas dedamas į agarą arba cukraus sultinį, tai yra į bakterijoms palankią maistinę terpę. Tai padeda jiems augti ir vystytis.

Atliekant šlapimo LHC analizę, mikroorganizmų koncentracija (skaičius) viename biomedžiagos tūrio vienete nustatoma kolonijas formuojančiais vienetais (CFU). Jie atstovauja vieną gyvą mikrobų ląstelę, kuri vėliau gamina visą mikroskopinių organizmų koloniją.

Šio tipo šlapimo diagnozė yra patikimiausia. Jis gali pateikti duomenis, kurių negalima gauti iš kitų šlapimo tyrimų. Tačiau pastebimas ir jo trūkumas. Tai slypi tyrimo trukmėje, taip pat aukštuose reikalavimuose renkant medžiagą.

Indikacijos analizei

• šlapimo sistemos infekcijos;
• terapinės terapijos kontrolė;
• nustatytos ligos išaiškinimas;
• esamos ligos recidyvas;
• nėštumas;
• cukrinis diabetas ir imunodeficitas;
• prielaidos apie florą, atsparią gydymui antibiotikais.

Pasiruošimas analizei

Medžiaga surenkama į sterilų plastikinį indą. Tai turėtų būti vidutinė rytinė šlapimo dalis (nuo trijų iki penkių mililitrų). Laboratorijoje žmogui duodamas konteineris medžiagai surinkti. O pati šlapimo paėmimo procedūra turėtų būti atliekama po tinkamo lytinių organų higieninio tualeto. Tokiu atveju antiseptikai neturėtų būti naudojami. Medžiaga diagnostikai renkama prieš pradedant gydymą antibiotikais arba jo intervalais. Po tokio gydymo turi praeiti dvi ar trys savaitės, kol bus atliktas bakteriologinis šlapimo tyrimas.

Surinkta šlapimo dalis turi būti gabenama į trumpas laikotarpis laikas. Jei medžiagos mėginys laikomas +18-20 laipsnių Celsijaus temperatūroje – nuo ​​vienos iki dviejų valandų. Jei šlapimas laikomas šaldytuve +4-8 laipsnių temperatūroje – nuo ​​penkių iki šešių valandų.

Analizės rūšys

Tarp bakteriologinės šlapimo analizės yra:

• BAK šlapimo pasėlis florai, nustatant jautrumą pagrindiniam antibiotikų spektrui;
• BAK šlapimo kultūra florai, nustatant jautrumą Platus pasirinkimas antibiotikai;
• Šlapimo BAC pasėlis florai, nustatant jautrumą pagrindiniam antibiotikų ir bakteriofagų spektrui;
• Šlapimo BAC kultūra florai, nustatant jautrumą įvairiems antibiotikams ir bakteriofagams.

Visi aukščiau išvardyti diagnostikos tipai leidžia teisingai nustatyti antibiotiko tipą tolesniam gydymui.

LAC šlapimo tyrimas nėštumo metu

Bakteriologinė diagnostika nėštumo metu yra įtraukta į pagrindinį atliekamų tyrimų sąrašą. Moterims medžiaga tokio tipo tyrimams gali būti paimta iš makšties, nosies ir šlapimo. Iš makšties paimama medžiaga lytiniu keliu plintančioms ligoms nustatyti. Iš nosies – nustatyti Staphylococcus aureus. Šlapimo mėginys naudojamas asimptominei arba latentinei bakteriurijai nustatyti.

LHC šlapimo analizė nėštumo metu turi būti atliekama du kartus. Pirmasis yra registruojantis su nėščiųjų klinika, o antroji – 36 nėštumo savaitę. Tačiau yra galimybė atlikti analizę ir didelis kiekis kartų, jei nėščia moteris serga inkstų, šlapimo pūslės ligomis ir taip pat padidintas kiekis baltymų ar leukocitų, kai klinikinė analizėšlapimas.

Paruošimas

Norėdami surinkti medžiagą tyrimams, nėščia moteris turi įsigyti sterilų indą, į kurį būtų galima įdėti vidutinę rytinio šlapimo dalį. Po to biomedžiaga siunčiama į medicinos laboratoriją.

Kad analizė parodytų patikimi rezultatai, rinkdami medžiagą turėtumėte vadovautis pagrindinėmis rekomendacijomis. Jie apima:

• kruopštus higieninis lytinių organų tualetas;
• renkant vidutinę medžiagos dalį (renkant šlapimą, į makštį reikia įkišti tamponą);
• normalus gėrimo režimas (gerti daug skysčių gali iš anksto atskiesti šlapimo koncentraciją ir pašalinti bakterijas iš organizmo);
• biomedžiagos pristatymas į laboratoriją per valandą.

Šlapimo bakteriologinio tyrimo aiškinimas

CFU

Iššifruojant rezultatus dažnai randama santrumpa CFU. Kaip minėta aukščiau, CFU yra kolonijas formuojantis vienetas. Jei tyrimo metu nustatoma, kad jo kiekis neviršija 1000 KSV/ml, tai reiškia, kad medžiagos mėginyje, kuris atsitiktinai pateko iš lytinių organų, yra mikrobų. Tokiu atveju gydymas nereikalingas.

Kai tyrimo rezultatas rodo, kad koloniją formuojančių vienetų skaičius yra 1 000 000, tai reiškia, kad yra uždegiminis procesas sukeltas lytinių organų infekcijų. Taikant tokio tipo tyrimus, nustatomas bakterijų tipas ir jautrumas antibiotikams.

Analizės rezultatas gali rodyti tarpines ribas, pvz., 1000-10000 KSV/ml. Dėl šio įvertinimo kyla abejonių ir pati diagnozė turėtų būti kartojama. Bet kokiu atveju jo aiškinimą turėtų atlikti tik gydantis gydytojas.

Bakterijos šlapime

Dažnai BAK analizė rodo, kad šlapime yra bakterijų, kurios pateko į jį iš žmogaus storosios žarnos. Jie išvyksta iš teritorijos išangėĮ šlaplė, po kurio jie prasiskverbia į šlapimo pūslė ir toliau. Šis bakterijų įsiskverbimo būdas paprastai vadinamas kylančiu. Dažniausiai tokio tipo mikrobų poveikis pasireiškia moterims dėl jų anatominė struktūra. Taip pat yra nusileidimo kelias, kuriuo mikroorganizmai patenka į šlapimą infekcijos metu inkstuose. Atliekant tokį vertinimą, analizė turėtų būti atlikta gydomoji terapija antibiotikų vaistai.

4.5 4,50 iš 5 (5 balsai)